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文檔簡介
1、目的:探討不同濃度阿托伐他汀鈣促進成骨細胞(osteoblast, OB)增殖、分化和礦化能力影響的作用和機制。 方法:取出生24 小時SD大鼠顱骨,用機械分離和酶消化法進行成骨細胞培養(yǎng),以細胞形態(tài)學(xué)、堿性磷酸酶染色和礦化結(jié)節(jié)染色鑒定。取傳1 代成骨細胞給予10-5 mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L 三種不同濃度的阿托伐他汀,并設(shè)空白和雌激素10-8 mol/L 為對照組,在培養(yǎng)24、48、72 小時時,
2、取各個時間段細胞上清液,應(yīng)用熒光檢測抗體-抗原結(jié)合物的方法(ELISA 法)測腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和護骨素(OPG),在培養(yǎng)72 小時,觀察(OB)增殖能力(四唑鹽法,即MTT 法)、成骨細胞堿性磷酸酶活性(ALP)(對-硝基苯磷酸鹽即PNPP 法),培養(yǎng)1 月后觀察OB 礦化結(jié)節(jié)形成能力(茜素紅染色)。 結(jié)果: 1,與空白對照組比較,阿托伐他汀10-5 mol/L、阿托伐他汀10-6 mol/L 和阿托伐他
3、汀10-7 mol/L 組培養(yǎng)至48、72 小時后,其OPG 的含量明顯升高,有顯著差異(P=0.003、P=0.0167、P=0.024),而三組之間的比較,無顯著差異(P>0.05)。 2,阿托伐他汀各組與雌激素組比較,OPG的含量無顯著差異(P>0.05)。 3,各組細胞液中TNF-α含量無顯著差異(P>0.05)。 4,阿托伐他汀對細胞增殖率有促進作用。 5,阿托伐他汀對ALP 活性有促進作用。
4、 6,在礦化結(jié)節(jié)的數(shù)量上,阿托伐他汀10-5mol/L 與空白對照組比較存在顯著差異(P=0.0235);阿托伐他汀10-5mol/L 組與雌激素10-8 mol/L 組之間比較無顯著差異(P=0.0504);三組阿托伐他汀之間有顯著差異(P=0.0438);阿托伐他汀10-5 mol/L 組與阿托伐他汀10-7 mol/L 組之間比較有顯著差異(P=0.0347)。而在礦化結(jié)節(jié)的面積上,與空白對照組比較,阿托伐他汀10-5
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