QPCR技術監(jiān)測小麥-玉米種植體系中禾谷絲核菌時空分布.pdf

1、紋枯病是一種小麥-玉米兼發(fā)性土傳真菌病害，該病是由禾谷絲核菌（Rhizoctonia cerealis Vander Hoeven）導致的。近年來，紋枯病在我國小麥主產(chǎn)區(qū)發(fā)生程度呈逐年加重趨勢，已成為僅次于白粉病的第二大病害。本研究在建立了禾谷絲核菌QPCR檢測體系的基礎上，進一步監(jiān)測了小麥-玉米種植體系中植株體內(nèi)及根際土壤中禾谷絲核菌的時空動態(tài)分布。該研究旨在明確禾谷絲核菌在小麥-玉米種植體系中周年分布規(guī)律，同時也為小麥紋枯病制定科學

2、防治措施和預測預報提供部分理論參考。主要研究結(jié)果如下:
　　1.建立了禾谷絲核菌QPCR檢測最優(yōu)體系:20μL反應體系中，引物使用量為0.5μL，模板DNA使用量為1μL;反應條件為:95℃預變性15 min;95℃變性10s，60.2℃退火20s，72℃延伸10s，40個循環(huán)。
　　2.在小麥整個生育時期內(nèi)，禾谷絲核菌菌量在植株體內(nèi)的分布呈先上升再下降的趨勢。在分蘗期，小麥體內(nèi)禾谷絲核含量最低，為181.7ng/g;拔節(jié)期

3、最高，為4409.0ng/g。越冬期到返青期禾谷絲核菌增長速率最大。
　　3.玉米整個生育時期內(nèi)，禾谷絲核菌菌量在植株體內(nèi)的分布呈持續(xù)上升趨勢。玉米植株體內(nèi)禾谷絲核菌含量最低和最高時期分別為拔節(jié)期和乳熟期，分別為66.4ng/g和1272.3ng/g鮮組織，兩時期相差約19倍。
　　4.小麥根系是禾谷絲核菌侵染時間最長的部位，在各生育時期（三葉期除外）均可檢測到禾谷絲核菌。越冬前，禾谷絲核菌主要分布在小麥主莖1～2葉葉鞘和第

4、1蘗第1～2葉葉鞘，主莖第1和第2葉葉鞘禾谷絲核菌含量分別為53.3ng/g和123.5ng/g。返青后，禾谷絲核菌主要分布在主莖春生葉1～3葉葉鞘，第1蘗春生葉1～2葉鞘。拔節(jié)期，辛集試驗站禾谷絲核菌在主莖春生1～2葉葉鞘的DNA含量分別為81.0ng/g和26.4ng/g;保定試驗站禾谷絲核菌在主莖春生1～2葉葉鞘的DNA含量分別為516.1ng/g和122.3ng/g。
　　5.禾谷絲核菌在玉米植株體內(nèi)分布主要集中在第1～4

5、葉葉鞘，且各葉鞘內(nèi)禾谷絲核菌菌量在乳熟期達到最高值。辛集試驗站第1～4葉鞘禾谷絲核菌DNA含量分別為188.6ng/g、206.2ng/g、322.4ng/g、169.2ng/g;保定試驗站第1～4葉鞘禾谷絲核菌DNA含量分別為343.8ng/g、376.5ng/g、422.8ng/g、299.4ng/g。
　　6.在小麥-玉米種植體系中，土壤中禾谷絲核菌含量呈現(xiàn)先上升再下降再上升的趨勢。在玉米乳熟期，土壤中菌量最高，為8.14×