洋蔥鱗莖致腐細菌分離鑒定及抗性材料篩選.pdf

1、洋蔥(Allium cepa L.)為百合科蔥屬2年生植物，可以加強人體免疫，抑制癌癥，緩解哮喘，抵御流感，改善眼睛模糊，是一種營養(yǎng)價值與保健價值都很高的蔬菜。迄今，洋蔥在我國已廣泛栽培，但多年來連續(xù)重茬種植，加之氣候環(huán)境的影響，導致洋蔥鱗莖腐爛性病害發(fā)生廣泛，嚴重影響了洋蔥的產業(yè)發(fā)展與品質性狀，降低了農民的利益，洋蔥的抗病材料選育成為了急需解決的問題。為此，本試驗選取腐爛洋蔥為試材，分離致病菌，以形態(tài)學特征結合分子生物學方法鑒定其種類

2、;利用人工接種鑒定方法篩選最佳接種方案;對37份洋蔥材料進行抗病性鑒定，從而為洋蔥的抗病育種提供參考，為洋蔥病害的防治提供依據。
　　試驗結果歸納如下:
　　(1)本試驗研究選取黑龍江省3地（哈爾濱、齊齊哈爾、牡丹江）腐爛的洋蔥鱗莖進行病原菌分離鑒定，共分離出21種菌株，經過致病性檢測，確定3種菌株有致病力，利用16SrRNA序列分析，確定3菌株中2種（W-1，W-4）為同一種菌，屬假單胞菌屬（Pseudomonassp.）

3、，另一致病菌(Z-1)為洋蔥伯克霍爾德菌（Burkholderia cepacia）。
　　(2)菌株W-1為革蘭氏染色陰性菌，在NA培養(yǎng)基生長良好，適宜生長溫度為25℃，致死溫度49℃，菌體桿狀，極生1-4根鞭毛，為好氧性細菌。菌株W-1進行生理生化測定結果:37℃和5％的NaCl生長試驗均為陽性，檸檬酸鹽試驗與吲哚試驗為陽性，V.P測定陰性，硝酸鹽還原陽性。菌株Z-1為革蘭氏染色陰性菌，在NA培養(yǎng)基生長良好，適于在CVP培養(yǎng)基

4、中分離，最適生長溫度為30℃，致死溫度52℃，菌體短桿狀，兩端鈍圓，極生多根鞭毛。菌株Z-1進行生理生化測定結果:37℃和5％的NaCl生長試驗均為陽性，明膠水解陽性，硝酸鹽還原為陰性，酪氨酸水解為陰性。
　　(3)接種鑒定結果表明:菌株W-1最佳接種組合為A2B2C3，即在洋蔥八葉期以注射法配制菌濃度3×108 cfu/ml，可最為有效地鑒定洋蔥的抗病性。菌株Z-1的篩選的接種方案為組合A1B3C3（摩擦法、九葉期、3×108

5、cfu/ml）和A2B2C3（注射法、八葉期、3×108cfu/ml）。
　　(4)對37分洋蔥種質資源進行腐爛病抗性鑒定，篩選鑒定結果證明:37份材料中沒有免疫材料，對假單胞菌屬具有高抗性(HR)的材料有4份，抗病(R)材料7份，中抗(MR)品種7份，感病(S)品種10份，極易感病(HS)品種有9份;對洋蔥伯克霍爾德菌（Burkholderiacepacia）具有高抗性(HR)的品種有4份，抗病(R)品種6份，中抗(MR)品種有