大白菜軟腐病頡頏細菌的分離、篩選及鑒定.pdf

1、軟腐病屬于細菌性病害，因其危害性被稱為大白菜三大病害之一，由軟腐歐文氏菌(Erwinia.carotovora)引起。該病害在前期干旱、后期多雨或灌溉不當情況下，很容易在生產(chǎn)中大面積流行，造成嚴重減產(chǎn)，是影響大白菜優(yōu)質(zhì)、穩(wěn)產(chǎn)的重要因素。目前，對該病的防治主要采用選育抗病品種和藥劑防治相結(jié)合的方法，但效果并不十分理想。 本試驗旨在從白菜根際土壤中分離、篩選出對大白菜軟腐病菌有較好頡頏作用的頡頏細菌；對頡頏效果較好的生防菌株進行發(fā)酵

2、優(yōu)化和鑒定，以期為白菜軟腐病的防治提供新的解決方案。 (1)本試驗首次從采自陜西楊凌、周至和西藏拉薩、林芝地區(qū)白菜根際的7個土樣中分離得到了254株細菌，通過瓊脂平板和液體發(fā)酵平板初篩試驗、盆栽復篩試驗得到了一株對白菜軟腐病菌具有強烈頡頏作用的新菌株L227-3。 (2)菌株L227-3的抑菌譜測定結(jié)果表明：該菌株抑菌譜較廣，其發(fā)酵液對多種病原菌有很高的頡頏活性；室內(nèi)檢測對供試的病原真菌和細菌都有較好的抑制效果，其中對大

3、白菜軟腐病菌和小麥全蝕病菌的抑制能力最強。 (3)將頡頏菌株L227-3接種于白菜傷口處，觀察頡頏菌對白菜的影響，結(jié)果表明，L227-3菌株為無毒菌株，對白菜無不良影響。 (4)利用玻皿培養(yǎng)法測定了頡頏菌L227-3對白菜種子萌發(fā)及胚根生長的影響，發(fā)現(xiàn)頡頏菌對白菜種子萌發(fā)無不良影響。且經(jīng)頡頏細菌處理后的胚根長度明顯大于單用清水處理的胚根長度，胚根生長勢也相對旺盛。 (5)對L227-3菌株發(fā)酵條件進行了優(yōu)化，確定

4、該菌株的最佳培養(yǎng)時間是30h，最適生長溫度31℃，且培養(yǎng)基初始pH為7.0，裝液量50mL，搖瓶轉(zhuǎn)速為150r/min時，L227-3菌株發(fā)酵液的抑菌效果最佳。添加PA能促進L227-3菌株細胞生長、繁殖，提高菌株的發(fā)酵性能，緩和pH的變化對菌株生長的影響，增強L227-3菌株的抑菌能力。 (6)按照傳統(tǒng)鑒定方法，根據(jù)菌株L227-3的培養(yǎng)性狀、形態(tài)特征、染色反應(yīng)及一些生理生化反應(yīng)的試驗結(jié)果，并參照相關(guān)文獻，初步判定為多粘芽孢桿