粘細菌的分離純化、鑒定及生物活性物質(zhì)的篩選研究.pdf

1、粘細菌（myxobacteria）是原核生物中一類可滑行的革蘭氏陰性真細菌，形態(tài)特殊復雜，能夠在細胞間通過信號的傳遞與感應，協(xié)同攝食、運動和發(fā)育形成子實體和抗逆性強的粘孢子，具有明顯的社會學特征。鑒于粘細菌能產(chǎn)生豐富的結構特殊而新穎的生物活性物質(zhì)，而且具有其他微生物的代謝物所不具備的活性作用機制，使粘細菌成為目前新藥研發(fā)的一類重要藥物資源菌。
　　本研究通過處理來自河北（保定、遷徙、平泉、興隆和遵化）、福建（福州和漳州）、云南（昆

2、明）不同地區(qū)的230個樣品，在經(jīng)典的粘細菌分離純化方法的基礎上，針對粘細菌的生物學特性進行了方法上的改進，共分離出200株粘細菌純培養(yǎng)物，其中29株具有纖維素降解活性。對其中40株粘細菌純培養(yǎng)物進行了系統(tǒng)發(fā)育分析，初步確定了其系統(tǒng)發(fā)育地位。另外，本研究還對部分粘細菌菌株的生物活性物質(zhì)進行了篩選。
　　對40株粘細菌純培養(yǎng)物16S rDNA系統(tǒng)發(fā)育分析，將37株歸屬于粘球菌屬（Myxococcus）、1株歸屬于珊瑚球菌屬（Coral

3、lococcus）和2株歸屬于匣狀球菌屬（Pyxidicoccus）。
　　對所得到的粘細菌純培養(yǎng)進行了生物活性產(chǎn)物的篩選，采用3種以甲醇為唯一碳源的培養(yǎng)基對60株粘細菌菌株進行搖瓶培養(yǎng)發(fā)酵，采用光譜學分析法及HPLC法篩選發(fā)酵液中的吡咯喹啉醌，獲得2株甲醇利用型吡咯喹啉醌產(chǎn)生菌，均歸屬于粘球菌屬（Myxococcus）；以香豆素為模型，從100株粘細菌中篩選到1株具有降解黃曲霉毒素潛在能力的菌株，16S rDNA序列系統(tǒng)發(fā)育分析

4、結果顯示它與變金黃粘球菌（Myxooccus flavescens）相似度最高。其中菌株95032不僅可以產(chǎn)生吡咯喹啉醌，還具有黃曲霉毒素降解潛力。
　　以葡萄糖（Glu）、海藻糖（Fuc）、脫氧核糖（Rib）、果糖（Fru）、半乳糖（Gal）、甘露糖（Man）、木糖（Xyl）、赤蘚糖（Ery）、鼠李糖（Rha）、阿拉伯糖（Ara）、山梨糖（Sor）、半乳糖醛酸（Gal acid）和半乳糖醇（Galactitol）為單糖標準品，采