仁用杏與扁桃屬間雜交種的獲得及SSR分析.pdf

1、本文以仁用杏及扁桃為試驗(yàn)材料，通過TTC染色法對(duì)授粉前父本花粉的活力進(jìn)行了測定，運(yùn)用DPSv3.01專業(yè)版數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)軟件對(duì)授粉后坐果率的調(diào)查數(shù)據(jù)進(jìn)行了分析；利用熒光顯微技術(shù)對(duì)花粉在柱頭的萌發(fā)情況及花粉管的生長狀況進(jìn)行了動(dòng)態(tài)觀察；采用正交設(shè)計(jì)對(duì)仁用杏雜交苗SSR-PCR反應(yīng)的5因素4水平進(jìn)行試驗(yàn)；在新體系的基礎(chǔ)上對(duì)50個(gè)雜交苗進(jìn)行了分析。結(jié)論如下: 1.通過TTC染色對(duì)花粉的觀察，可知父本花粉的活力都很高，能夠滿足雜交授粉的要求

2、，但是也存在一定的局限性，不能很準(zhǔn)確的反映出花粉萌發(fā)力的大小；坐果率的調(diào)查數(shù)據(jù)經(jīng)DPSv3.01專業(yè)版數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)軟件分析后，可知三個(gè)雜交組合之間的差異均顯著。 2.對(duì)仁用杏×扁桃屬間雜交授粉后花粉管的行為進(jìn)行觀察。結(jié)果表明，扁桃的花粉能在仁用杏的花柱頭上萌發(fā)，進(jìn)入花柱，到達(dá)花柱基部，進(jìn)入子房。雜交后，花粉管到達(dá)花柱1/2處時(shí)花粉管數(shù)量明顯變少，極少數(shù)的花粉管到花柱基部進(jìn)入子房，個(gè)別花粉管出現(xiàn)局部膨大或變細(xì)、末端變細(xì)、中間斷開或

3、折疊等現(xiàn)象，但沒有出現(xiàn)胼胝質(zhì)的大量沉積。 3.采用正交設(shè)計(jì)對(duì)仁用杏雜交苗SSR-PCR反應(yīng)的5因素4水平進(jìn)行試驗(yàn)，通過極差分析法對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，建立了仁用杏雜交苗SSR-PCR反應(yīng)的最佳體系:即在20μL反應(yīng)體系中，1×buffer、2.0mM/LMg2+、0.25mM/LdNTPs、0.25μM/L Primer、60ng/20μL，模板DNA和0.05U/μLTaq酶。 4.在新SSR.PCR體系中對(duì)32對(duì)引物進(jìn)行了

4、篩選，最終得到了13對(duì)信號(hào)強(qiáng)、多態(tài)性高的引物。利用這13對(duì)引物對(duì)父母本及雜種苗等55個(gè)樣品進(jìn)行了分析，結(jié)果為:13對(duì)引物平均鑒定率達(dá)到了69.69％，其中有9對(duì)的鑒定率高于70％，占總數(shù)的69.23％，引物13號(hào)和30號(hào)的鑒定率最高為100％，24號(hào)引物最低只有10％。這表明，所選用的SSR引物的多態(tài)性高、信號(hào)強(qiáng)，其產(chǎn)生的多態(tài)性差異能夠有效用于50個(gè)雜交后代鑒定。 5.運(yùn)用統(tǒng)計(jì)分析軟件NTSYSpc2.02a對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的譜帶進(jìn)行