雞與鵪鶉屬間雜交種胚胎肌肉組織發(fā)育相關(guān)基因的篩選.pdf

1、脊椎動(dòng)物肌纖維類型和數(shù)量主要由遺傳因素決定，肌肉組織中的肌纖維在胚胎期已經(jīng)形成了，出生后其肌纖維數(shù)不再改變，肌肉生長(zhǎng)主要依賴肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖分化導(dǎo)致的肌纖維長(zhǎng)度增加和周徑增大，而非細(xì)胞的增生或肌細(xì)胞數(shù)目的增多。即肌肉的早期發(fā)育是動(dòng)物的產(chǎn)肉潛力及肌肉品質(zhì)的關(guān)鍵，其發(fā)育狀況直接決定動(dòng)物的肉產(chǎn)量和質(zhì)量。家雞是研究肌肉發(fā)育調(diào)控過程中非常好的動(dòng)物模型，蛋雞和肉雞在骨骼肌生長(zhǎng)速率上存在顯著差異。雞與鵪鶉屬間雜交，其屬間雜交種具有雙親的肉品質(zhì)特點(diǎn)，且

2、基因及相關(guān)性狀發(fā)生分離和重新組合的現(xiàn)象，適合作為肉品質(zhì)研究的一種生物學(xué)模式生物。
　　 本研究分別選用肉用種公雞和蛋用種公雞當(dāng)做父本，朝鮮鵪鶉當(dāng)做母本進(jìn)行雞與鵪鶉屬間雜交，通過人工受精、孵化、采樣等一系列過程，共收集獲得了19個(gè)13日齡肉用型屬間雜交種胚胎肌肉組織和21個(gè)13日齡蛋用型屬間雜交種胚胎肌肉組織用于抑制性消減雜交實(shí)驗(yàn)，其可以明確揭示肌肉發(fā)育基本規(guī)律。
　　 以肉用型公雞當(dāng)做父本，鵪鶉當(dāng)做母本的雞與鵪鶉屬間雜交

3、種胚胎肌肉組織和蛋用型公雞當(dāng)做父本，鵪鶉當(dāng)做母本的雞與鵪鶉屬間雜交種胚胎肌肉組織為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，利用抑制性消減雜交技術(shù)，進(jìn)行了正向抑制性消減雜交，成功構(gòu)建了肌肉發(fā)育相關(guān)的消減文庫(kù)。藍(lán)白斑實(shí)驗(yàn)獲得180個(gè)克隆菌落，利用Nested Primer 2R和Nested Primer 1為引物對(duì)每個(gè)克隆進(jìn)行了PCR檢測(cè)，篩選重組克隆并鑒定插入片段的大小，棄陰性克隆和PCR產(chǎn)物為多條帶的克隆，最后從消減cDNA質(zhì)粒文庫(kù)中篩選到140個(gè)有效陽(yáng)性克