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1、中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院中國人民解放軍總醫(yī)院博士學(xué)位論文有先兆偏頭痛大鼠三叉神經(jīng)脊束核基因表達譜的實驗研究姓名:劉若卓申請學(xué)位級別:博士專業(yè):神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師:于生元20080527軍醫(yī)進修學(xué)院博士學(xué)位論文取出延髓及上頸段(至頸2),抽提RNA,并使用紫外定量和變性凝膠電泳質(zhì)檢,合成雙鏈cDNA,進行純化,體外轉(zhuǎn)錄合成生物素標記cRNA,純化、定量和檢測,片段化、檢測,進行芯片雜交,清洗染色,將芯片放入基因芯片掃描儀3000進行掃描,
2、使用GeneChipoperatingsoftware(GCOS)對掃描圖像進行處理分析,獲得數(shù)據(jù)。使用SAM軟件進行處理篩選出差異基因;使用CB—MAS一40一生物分子功能注釋系統(tǒng)(MAS)把挑選出的差異表達基因進行了Pathway和GO的統(tǒng)計分析,分別對差異基因進行了進一步的功能分類。3有先兆偏頭痛三叉神經(jīng)脊束核變化基因的功能分析:采用實時定量PCR實驗的方法對差異基因中的4個進行驗證,使用生物信息學(xué)方法分析差異基因的功能。綜合評價
3、CSD參與有先兆偏頭痛的分子生物學(xué)機制結(jié)果:1采用高K腦皮層微量注射的方法成功誘發(fā)CSD,建立有先兆偏頭痛模型,與對照組相比,電生理記錄圖顯示高K注射后出現(xiàn)明顯的電信號的抑制和翻轉(zhuǎn)。2AffymetrixRatGenomearray23020芯片全基因組31099個轉(zhuǎn)錄子中,根據(jù)detectionPvalue004為“present”,對照組三叉神經(jīng)脊束核共檢測到20025個,占總數(shù)的6439%,而CSD實驗組三叉神經(jīng)脊束核共檢測到20
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