中藥射干和海南狗牙花活性成分研究.pdf

1、本文應用多種現(xiàn)代色譜手段分別對射干和海南狗牙花的化學成分進行了系統(tǒng)的分離與純化，并應用化學反應和分析光譜學進行了化學結(jié)構鑒定。從射干中分離得到35個化合物，鑒定了32個化合物(BC01～BC32)，其中2個為新化合物，1個為新天然產(chǎn)物，12個化合物為首次從該植物中分得；初步的雌激素樣活性試驗表明，射干總異黃酮對雌激素低下動物顯示弱雌激素樣作用。從海南狗牙花中分離得到34個化合物，鑒定了30個化合物(EH01～EH30)，其中2個為新化合

2、物，9個化合物為首次從該植物中分得，并首次對化合物EH08的立體結(jié)構進行了確定；初步的防治嗎啡依賴活性試驗表明，海南狗牙花總生物堿對嗎啡依賴的身體依賴性和精神依賴性都有一定的防治作用。 本研究選擇了我國的兩種藥用植物——射干和海南狗牙花進行系統(tǒng)的化學成分研究和活性評價。 射干是鳶尾科射干屬植物射干的干燥根莖。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味苦寒，入肝、肺經(jīng)，具有清熱解毒、利咽消痰、散血消腫的功效，主治咽喉腫痛、痰咳氣喘等。為常用

3、中藥材，且資源豐富，藥材射干主產(chǎn)于湖北、河南、江蘇和安徽，在湖南、陜西、浙江、貴州和云南等地亦產(chǎn)，部分地區(qū)也以白射干或用射干代替射干使用。 將射干的干燥根莖粉碎后，用80％乙醇加熱回流提取得浸膏，按常規(guī)方法將乙醇提取物分別用乙酸乙酯和正丁醇萃取，得兩個部位。通過反復硅膠柱層析、C<,18>反相硅膠柱層析、Sephadex LH-20 凝膠柱層析以及重結(jié)晶等從中分離得到了35個化合物，應用化學及光譜分析方法鑒定了32個化合物的結(jié)構

4、。其中19個異黃酮類化合物(包括了 7 個異黃酮苷)：野鳶尾苷元(BC01)、鳶尾黃素(BC02)、5,6,7,3′-四羥基-4′-甲氧基異黃酮(BC03)、次野鳶尾黃素(BC04)、去甲基次野鳶尾黃素(BC05)、鳶尾黃酮甲素(BC06)、白射干素(BC07)、尼鳶尾黃素(BC08)、5,7-二羥基-6，3′，4′，5′-四甲氧基異黃酮(BC09)、isoirigenin(BC10)、psi-tectorgenin(BC11)、5，7

5、，4′-三羥基-6，3′，5′-三甲氧基異黃酮(BC12)、野鳶尾苷(BC13)、3′，5′．二甲氧基尼鳶尾黃素-4′-O-β-葡萄糖苷(BC14)、鳶尾苷(BC15)、鳶尾黃素-4′-O-β-葡萄糖(BC16)、3′-羥基鳶尾苷(BC17)、6″-O-p-hydroxybenzoyliridin (BC18)、6″-O-vanilloyiridin(BC19)；3個為黃酮類化合物：粗毛豚草素(BC20)、kanzakiflavone-

6、2(BC21)、5，4′．二羥基-6,7-亞甲二氧基-3′-甲氧基黃酮(BC22)；3 個為黃酮醇類化合物：3′-O-甲基鼠李素(BC23)、異鼠李素(BC24)、3，5，3′-三羥基-7,4′，5′-三甲氧基黃酮(BC25)： 1個β-卡波林型生物堿：哈爾滿 (BC26)；1個cycloeucalenol型三萜：31-去甲環(huán)阿爾廷醇(BC29)；其余為香草乙酮(BC27)、5-羥甲基糠醛(BC28)、十七烷酸甘油酯(BC30)、β-谷

7、甾醇(BC31)、β-胡蘿卜苷(BC-32)。 所分得的化合物中有2個新化合物(BC14、BC22)，1個新天然產(chǎn)物(BC-12)，12個化合物為首次從該植物中分得(BC08、BC09、BC10、BC11、BC16、BC17、BC21、BC25、BC26、BC28、BC29、BC30)。 對射干總異黃酮的雌激素樣活性進行了初步研究，以大豆異黃酮為陽性對照，分高、中、低劑量組研究了射干總異黃酮對去卵巢大鼠雌激素水平的影響。

8、結(jié)果表明，射干總異黃酮對雌激素低下動物顯示有雌激素樣作用。 海南狗牙花的根也叫單根木、獨根木、山辣椒樹、艾角青、雞爪花等，分布于海南、廣東、廣西、云南等地。有清熱解毒、降壓、消腫止痛之功效，用于高血壓病、咽喉腫痛、風濕痹痛等疾病的治療。馮孝章等從中分得11個單吲哚類生物堿和 7 個雙吲哚類生物堿，之后黃建鵬等又從中分得 2個新的單吲哚類生物堿。本課題的前期研究表明其總生物堿具有較好的戒毒活性。 將海南狗牙花干燥根莖粉碎后

9、，以95％乙醇滲漉提取得流浸膏，以酸溶堿沉法分為總生物堿和酸不溶物。兩部分經(jīng)反復硅膠柱層析、Sephadex LH-20 凝膠柱層析、C<,18>反相硅膠柱層析和重結(jié)晶的方法對單體成分進行分離純化，共分離得到34個化合物，應用化學及光譜分析方法鑒定了30個化合物的結(jié)構。其中18個吲哚類生物堿：伊波加明(EH01)、伊波加因(EH02)、伏康京堿(EH03)、19-海尼山辣椒堿(EH04)、19-表-海尼山辣椒堿(EH05)、冠狗牙花堿(

10、EH06)、3-羥基冠狗牙花堿(EH07)、3-(β-羥乙基)-冠狗牙花堿(EH08)、3-(2-羰丙基)-冠狗牙花堿(EH09)、3-氧代冠狗牙花堿(EH10)、ibogamine-18-carboxylic acid，3,4-didehydro- 7,8-dioxo-methyl ester(EH11)、冠狗牙花羥基偽吲哚堿(EH12)、19-海尼山辣椒羥基偽吲哚堿(EH13)、3-氧代-7R-羥基偽吲哚冠狗牙花堿(EH14)、3-

11、氧代-7S-羥基冠狗牙花偽吲哚堿(EH15)、3S,7R-氧化冠狗牙花堿(EH16)、老刺木堿(EH17)、老刺木堿-4-氮氧化物(EH18)；7個三萜類化合物：環(huán)阿爾廷醇(EH21)、23-環(huán)木菠蘿烯-3β,25-二醇(EH22)、鈍葉甾醇(EH23)、α-香樹脂醇(EH24)、α-香樹脂醇乙酸酯(EH25)、11-氧代-α-香樹脂醇乙酸酯(EH26)、β-香樹脂醇乙酸酯(EH27)；1個異香豆素：8-羥基-6-甲氧基-3-正戊基異香

12、豆素(EH20)；其余為：鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(EH19)、豆甾醇(EH28)、4,22-豆甾二烯-3-酮(EH29)、β-谷甾醇(EH30)。 所分得的化合物中有2個新化合物(EH15、EH16)，9個化合物為首次從該植物中分得(EH10、EH13、EH14、EH18、EH19、EH20、EH23、EH28、EH29)，并首次對化合物EH08的立體結(jié)構進行了確定。 嗎啡誘導的條件性位置偏愛試驗(CPP)結(jié)果顯