寧夏回漢族人群動脈粥樣硬化相關基因甲基化譜差異分析.pdf

1、目的：
　　揭示DNA甲基化，在寧夏回漢族人群中動脈粥樣硬化(AS)發(fā)生發(fā)展過程中出現(xiàn)的異常改變，建立回漢族兩民族之間，AS的特異性DNA甲基化譜，探索特異性DNA甲基化譜，在回漢人群中，對AS的早期風險評估及預測作用，為早期預防、診斷及治療AS提供新思路及線索。
　　方法：
　　研究對象：寧夏回漢AS和正常健康人群，年齡30-65歲；收集標本時間：2013年1月至2014年2月；收集標本地點：寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院心內科

2、和體檢部。標本采集及檢測：空腹采集足夠的靜脈血液，分離血漿和血細胞，生化分析儀檢測血漿中的TG、TC、HDL和LDL，血細胞用于提取DNA和RNA，檢測外周血細胞DNA甲基化及其mRNA表達；研究對象分組標準：臨床指征和血脂水平作為輔助診斷，頸動脈多普勒超聲確診AS斑塊存在的人群，分為AS組，跟據(jù)民族，分為回族AS組和漢族AS組；頸動脈多普勒超聲確診無內膜增厚和斑塊形成的人群，作為正對常對照組，根據(jù)民族，分為回族正常對照組和漢族正常對照

3、組；總共四組，每組的樣本各50例，提取每組外周血樣本的DNA和RNA進行下一步實驗，將從樣本中提取的DNA進行重亞硫酸鹽修飾，用ntMS-PCR檢測篩選的11個基因的啟動子區(qū)甲基化水平，用實時熒光定量PCR檢測建譜基因的mRNA相對表達水平，探討這兩民族AS的DNA甲基化是否存在差異以及和基因表達的關系，經(jīng)過統(tǒng)計分析，篩選出特異性和敏感性較高的基因，作為研究目標，建立回漢族AS特異性DNA甲基化譜，評價DNA甲基化譜，在回漢族AS疾病，

4、早期分子生物學標志物預測及診斷價值。
　　結果：
　　結果顯示，LCAT、PPARα、TIMP-1、ICAM1和ABCA1這五個基因的甲基化程度，在回族AS組和回族對照組間，有著明顯差異（P<0.05）；PPARα、TIMP-1和ABCA1三個基因甲基化程度，在漢族AS組和漢族AS組對照組間，有差異（P<0.05）；結果還顯示，LCAT、PPARα、TIMP-1和ABCA1，在回族AS人群中，具有較好的診斷價值（P<0.05

5、）；在漢族AS人群中，只有TIMP-1具有診斷價值，如果將LCAT、PPARα、TIMP-1和ABCA1這四個基因聯(lián)合檢測AS，則預測回族AS的靈敏度和特異度達到86.1%和88.1%，聯(lián)合診斷價值達到0.923，這一結果說明建立及應用DNA甲基化譜在預測早期回族AS的發(fā)生及發(fā)展有意義。
　　結論：
　　1.回族AS組和回族對照組相比較，LCAT、PPARα、TIMP-1、ICAM1和ABCA1五個基因甲基化改變有顯著差異。