轉(zhuǎn)Bt基因南林895楊的抗蟲性檢測與對土壤微生物影響的初步分析.pdf

1、中國楊樹的栽培居世界首位。但單一品種的過度利用導(dǎo)致楊樹蟲害愈演愈烈。利用基因工程技術(shù)培育抗蟲楊樹新品種已迫在眉睫。本文選擇轉(zhuǎn)抗蟲基因(Bt、CpTI)南林895楊為試驗材料，開展了分子檢測、抗蟲性測定及生物安全性初步評估，為選育抗蟲轉(zhuǎn)基因楊樹新品種提供了依據(jù)。主要研究結(jié)果如下： 1.通過對基本培養(yǎng)基、激素組合、培養(yǎng)條件等篩選，改良了轉(zhuǎn)基因南林895楊的組培繁殖體系。其中葉片誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為：MS+0.5mg/L 6-BA+0.0

2、02mg/L，TDZ+0.1mg/L NAA，蔗糖30g/L，瓊脂7.0g/L；芽增殖培養(yǎng)基：MS+0.2mg/L 6-BA+0.001mg/L TDZ+0.05mg/L NAA，蔗糖30g/L。瓊脂7.0g/L；生根培養(yǎng)基：1/2MS+24g/L蔗糖。建立的組培體系提高了轉(zhuǎn)基因楊樹的組培繁殖效率：分化率由91％提高至1 00％，增值系數(shù)由11.6％提高至36.0％，為開展分子檢測與抗蟲轉(zhuǎn)基因895楊生物學(xué)測定提供了基礎(chǔ); 2.

3、由于林木生長周期長，為跟蹤轉(zhuǎn)基因895楊的遺傳穩(wěn)定性，對繼代培養(yǎng)達4年的轉(zhuǎn)Bt基因895楊11個株系B2、B17、B4、B1、B21、B16、B6、B8、B12、B3、B5等進行了PCR檢測，分析結(jié)果表明這批轉(zhuǎn)基因895楊仍攜帶有外源目的基因，為選育抗蟲轉(zhuǎn)基因楊新品種提供了依據(jù)； 3.本研究采用楊小舟蛾健康四齡幼蟲進行田間試驗轉(zhuǎn)基因南林895楊10個株系B5、B7、B16、B2、B12、B4、B1、B17、B21、C4的抗蟲性生

4、物測定。結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因植株表現(xiàn)出了不同程度的抗蟲性。其中抗蟲性較高的株系有B21、B1、B4、B17，幼蟲平均校正死亡率(對照為0)分別達到25.6％、24.0％、15.0％、12.0％；轉(zhuǎn)基因楊樹葉片對幼蟲的體重有顯著抑制作用，其中B5、B4、C4、B21飼喂的幼蟲平均相對體重均下降了50.0％以上；室內(nèi)群體飼蟲實驗結(jié)果表明，B4、B1、B21植株對幼蟲的化蛹率產(chǎn)生顯著影響，化蛹率比對照下降30.0％以上，蛹重比對照下降33.3％以