新型極性修飾色譜固定相的研究及其在藥物分析中的應用.pdf

1、反相色譜是應用最廣泛的、最高效的分離技術(shù),它具有高分離效率,極好的重現(xiàn)性以及與質(zhì)譜兼容的特點?，F(xiàn)在市面上有很多不同品牌的反相-液相色譜固定相,并且一直在研發(fā)新的品種。然而,現(xiàn)存的硅膠-基質(zhì)的液相色譜固定相有一些缺點,例如,分離堿性化合物時峰拖尾,在某種程度上限制他們的應用。在過去幾十年,色譜工作者們長期致力于改善硅膠基質(zhì)的固定相的化學穩(wěn)定性相關(guān)的研究工作。到目前為止,有很多極性-嵌入或者極性-封端新型固定相,這些固定相在反相色譜條件下對

2、極性、強堿性以及可電離的化合物進行色譜分離時能夠提供很好的分離性能。
　　研究目的：
　　1、設(shè)計合成三個新型C10二肽類極性固定相,并對其合成路線進行篩選優(yōu)化。
　　2、二肽類固定相制備成C10色譜柱后,用國際公認方法對其色譜性能進行測試評價。
　　3、考察制備的二肽類極性色譜柱實際分離分析不同類型藥物色譜能力。
　　4、對利福噴丁的人體生物等效性進行研究。
　　實驗內(nèi)容及結(jié)果：
　　1、設(shè)計

3、合成了三個新型C10二肽類極性固定相:
　　在DCC,DMAP作用下,采用直接縮合法制備中間體十一烷甘氨酰胺,再與N-氨丙基三甲氧基硅、N-氨丙基二甲基甲氧基硅、N-氨丙基二異丙基甲氧基硅反應,制得相應的硅烷中間體,產(chǎn)率分別為83.3％、85.1%、82.0%;然后再分別與硅膠鍵合、六甲基二硅氮烷封端制備得到多聚C10二肽固定相、C10二甲基二肽固定相和C10二異丙基二肽固定相。
　　2、對制備的三個C10二肽類固定相進行了

4、性能評價,并獲得了預期效果:
　　柱效與峰形測試、Engelhardt測試、Tanaka測試、Neue測試結(jié)果均表明我們制備的極性修飾二肽類固定相具有高選擇性、高靈敏度和優(yōu)秀的柱效。殘余硅羥基測試中分離吡啶和苯酚時,分離因子高,吡啶的峰拖尾因更低,表明我們制備的固定相封端效果很好。pH穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示,二甲基固定相在強酸、強堿條件下穩(wěn)定性很好。將同一樣品連續(xù)進樣1000次,過程中保留時間、峰形均小于1%,說明我們制備的固定相性能

5、穩(wěn)定重現(xiàn)性好。流動相的pH對選擇性的影響的實驗表明這些二肽固定相可以在pH1.5-11范圍內(nèi)使用。
　　3、對制備的三個C10二肽類固定相進行了藥物分析應用研究,也獲得了預期效果:
　　用制備的極性二肽類固定相考察以下八組不同類型的混合物在更寬泛的pH值和高水流動相條件下的分離效果:7類水溶性纖維素混合物;8類核苷酸混合物;α-,δ-,γ-生育酚混合物;β-受體阻斷劑;4個對羥基苯甲酸酯類物質(zhì);咖啡因代謝物等。結(jié)果表明,這八