Livin及PTEN在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及拓?fù)涮婵祵?duì)其增殖凋亡的影響.pdf

1、第一部分、Livin及PTEN蛋白在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤臨床病理特征的關(guān)系
　　 目的:研究視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma，RB)組織中Livin和PTEN蛋白的表達(dá)，探討視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中Livin和PTEN蛋白的表達(dá)及其與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤臨床病理特征的關(guān)系。
　　 方法:選取2000年1月至2010年12月在我院行手術(shù)治療，并經(jīng)病理證實(shí)為視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的43例患者的視網(wǎng)膜組織切片，用M

2、ax-visionTM快捷免疫組化法聯(lián)合檢測(cè)Livin和PTEN在正常視網(wǎng)膜和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其兩者的相關(guān)性，并分析其與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組中Livin、PTEN陽性表達(dá)分別為27例(62.79％)、20例(46.51％)，對(duì)照組分別為7例(20.59％)、31例(91.18％);Livin在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的表達(dá)明顯高于正常視網(wǎng)膜組織(x2=3.7

3、14，p＜0.05)，PTEN蛋白在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中表達(dá)與正常對(duì)照組比較明顯降低（x2=16.937，p＜0.05）。
　　 2.Livin表達(dá)與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的分化程度有關(guān)，PTEN表達(dá)與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的分化程度及臨床分期有關(guān)(p均＜0.05)。
　　 3.視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤標(biāo)本中，27例Livin陽性表達(dá)的標(biāo)本中，PTEN陽性表達(dá)8例，陰性表達(dá)19例;16例Livin陰性表達(dá)的標(biāo)本中，PTEN陽性表達(dá)12例，陰性表達(dá)4例

4、;二者呈負(fù)相關(guān)(r=-0.440，p=0.003)。
　　 結(jié)論:視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中Livin的激活與PTEN的失活或缺失之間存在相互協(xié)同作用，共同參與了視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)生發(fā)展，提示視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的形成是多基因、多因素共同作用的結(jié)果，聯(lián)合檢測(cè)Livin和PTEN可為視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的診斷和治療提供必要的理論依據(jù)。
　　 第二部分、拓?fù)涮婵祵?duì)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響
　　 目的:在體外觀察拓?fù)涮婵?to

5、potecan，TPT)是否對(duì)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Hxo-rb44細(xì)胞具有誘導(dǎo)凋亡和抑制增殖的作用，為探討拓?fù)涮婵祽?yīng)用于視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的臨床化療提供理論基礎(chǔ)。
　　 方法:常規(guī)培養(yǎng)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Hxo-rb44細(xì)胞株，加入不同濃度的拓?fù)涮婵?，采用MTT法觀察不同濃度的拓?fù)涮婵翟诓煌瑫r(shí)間點(diǎn)對(duì)Hxo-rb44細(xì)胞增殖的影響，并計(jì)算其IC50值。應(yīng)用流式細(xì)胞儀(flowcytometer, FCM)檢測(cè)不同濃度的拓?fù)涮婵底饔貌煌瑫r(shí)間后對(duì)

6、人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Hxo-rb44細(xì)胞株細(xì)胞凋亡的影響。
　　 結(jié)果:各濃度拓?fù)涮婵稻苊黠@抑制人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Hxo-rb44細(xì)胞的增殖，且拓?fù)涮婵祵?duì)Hxo-rb44細(xì)胞增殖的抑制率隨濃度增高和時(shí)間延長(zhǎng)而增加，且表現(xiàn)為明顯的劑量-效應(yīng)依賴性和時(shí)間-效應(yīng)依賴性。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果提示，拓?fù)涮婵悼擅黠@誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Hxo-rb44細(xì)胞凋亡的發(fā)生，并且與藥物濃度以及作用時(shí)間呈依賴關(guān)系。
　　 結(jié)論:拓?fù)涮婵祵?duì)人視網(wǎng)膜母細(xì)

7、胞瘤細(xì)胞株Hxo-rb44細(xì)胞具有誘導(dǎo)凋亡和抑制增殖的作用。
　　 第三部分、拓?fù)涮婵祵?duì)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中Livin和PTEN表達(dá)的影響
　　 目的:在體外觀察拓?fù)涮婵凳欠窬哂杏绊慙ivin及PTEN表達(dá)的作用，探討視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤治療的機(jī)理，為今后拓?fù)涮婵祽?yīng)用于視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的治療提供有力的理論基礎(chǔ)。
　　 方法:對(duì)人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞株Hxo-rb44進(jìn)行培養(yǎng)傳代，用Westernblot（蛋白質(zhì)免疫印跡）法檢測(cè)