P16基因的可控表達及其對膀胱胱癌細胞的體外生物學影響.pdf

1、在膀胱癌細胞中,純合缺失和甲基化是P16基因失活的主要形式.研究證明:恢復變異的P16基因功能或使用野生型P16基因替代變異的P16基因可以抑制膀胱癌細胞的生長.研究人員將構(gòu)建好的可誘導型人真核表達載體pMDNA3-16通過脂質(zhì)體介導的方法轉(zhuǎn)入人膀胱癌細胞系T24細胞中,用于替代因甲基化而喪失表達功能P16基因的作用.使用ZnSO<,4>作為誘導物,觀察P16基因的可控表達及其對膀胱癌細胞生長能力的影響.采用細胞生長曲線了解細胞生長情況

2、,原位雜交方法檢測P16基因的mRNA的轉(zhuǎn)錄,免疫細胞化學方法檢測P16蛋白的表達,流式細胞儀檢測P16蛋白對腫瘤細胞周期的影響.結(jié)論:P16基因與膀胱腫瘤的發(fā)生有關(guān),P16蛋白作用于細胞周期的G1/S關(guān)卡,對腫瘤細胞的生長有抑制作用,通過人工構(gòu)建的真核表達載體pMDNA3-P16可以實現(xiàn)對P16基因表達的調(diào)控.確定誘導物的適宜范圍和作用時間,在此基礎(chǔ)上摸索出P16蛋白表達量-效應(yīng)關(guān)系曲線問題,均需要今后進一步研究.研究人員的實驗為上述