掃描激光誘導(dǎo)熒光顯微鏡的構(gòu)建及其負(fù)反饋模式檢測(cè)基底形貌.pdf

1、全文分為三章： 第一章中對(duì)幾種掃描顯微鏡作了簡(jiǎn)要的綜述。主要從原理、應(yīng)用、特性以及局限性等方面對(duì)掃描電子顯微鏡(SEM)、掃描隧道顯微鏡(STM)、原子力顯微鏡(AFM)、掃描近場(chǎng)光學(xué)顯微鏡(SNOM)、掃描電化學(xué)顯微鏡(SECM)、共聚焦激光掃描顯微鏡(CLSM)等幾種掃描顯微鏡作了簡(jiǎn)要介紹。本章共引用文獻(xiàn)72篇。 第二章中我們?cè)O(shè)計(jì)了一種新的掃描探針顯微鏡——掃描激光誘導(dǎo)熒光顯微鏡(SLIFM)，并自己組裝了一套新儀器

2、。本儀器分為三部分：激光誘導(dǎo)熒光掃描系統(tǒng)，高靈敏的熒光檢測(cè)系統(tǒng)，用于控制激光誘導(dǎo)熒光掃描系統(tǒng)、收集熒光信號(hào)、處理數(shù)據(jù)的軟件系統(tǒng)。我們將光纖的一端固定在顯微鏡物鏡的聚焦點(diǎn)上，另一端作為光探頭固定在由三維馬達(dá)和壓電驅(qū)動(dòng)器構(gòu)成的三維操縱器上。通過計(jì)算機(jī)中軟件控制三維操縱器使光纖探頭在研究對(duì)象上方沿X、Y、Z軸方向以微米尺度移動(dòng)，通過檢測(cè)器(PMT)收集信號(hào)，利用CHI910B軟件對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行分析檢測(cè)。利用該儀器我們得到了光纖向盛有熒光物質(zhì)的

3、檢測(cè)池基底移動(dòng)時(shí)的逼近曲線，表征了微池中液面的形貌及微池的大小，測(cè)得的結(jié)果與實(shí)際大小一致，另外還對(duì)固定在基底上的HRP酶點(diǎn)的形貌進(jìn)行了表征。 第三章中我們制作了一種在光纖檢測(cè)端固定有酶分子的酶探頭，并以這種酶探頭對(duì)溶液中底物的催化反應(yīng)為基礎(chǔ)構(gòu)建了掃描激光誘導(dǎo)熒光顯微術(shù)的負(fù)反饋掃描模式。這種對(duì)光纖進(jìn)行修飾并可以對(duì)基底進(jìn)行檢測(cè)的光學(xué)探頭，在其他的掃描探針顯微鏡中還未曾報(bào)道過。我們?cè)诠饫w的端面上通過硅烷化的方法修飾了HRP分子制成可以