掃描激光誘導熒光顯微鏡的構(gòu)建及其負反饋模式檢測基底形貌.pdf

1、全文分為三章： 第一章中對幾種掃描顯微鏡作了簡要的綜述。主要從原理、應用、特性以及局限性等方面對掃描電子顯微鏡(SEM)、掃描隧道顯微鏡(STM)、原子力顯微鏡(AFM)、掃描近場光學顯微鏡(SNOM)、掃描電化學顯微鏡(SECM)、共聚焦激光掃描顯微鏡(CLSM)等幾種掃描顯微鏡作了簡要介紹。本章共引用文獻72篇。 第二章中我們設(shè)計了一種新的掃描探針顯微鏡——掃描激光誘導熒光顯微鏡(SLIFM)，并自己組裝了一套新儀器

2、。本儀器分為三部分：激光誘導熒光掃描系統(tǒng)，高靈敏的熒光檢測系統(tǒng)，用于控制激光誘導熒光掃描系統(tǒng)、收集熒光信號、處理數(shù)據(jù)的軟件系統(tǒng)。我們將光纖的一端固定在顯微鏡物鏡的聚焦點上，另一端作為光探頭固定在由三維馬達和壓電驅(qū)動器構(gòu)成的三維操縱器上。通過計算機中軟件控制三維操縱器使光纖探頭在研究對象上方沿X、Y、Z軸方向以微米尺度移動，通過檢測器(PMT)收集信號，利用CHI910B軟件對研究對象進行分析檢測。利用該儀器我們得到了光纖向盛有熒光物質(zhì)的

3、檢測池基底移動時的逼近曲線，表征了微池中液面的形貌及微池的大小，測得的結(jié)果與實際大小一致，另外還對固定在基底上的HRP酶點的形貌進行了表征。 第三章中我們制作了一種在光纖檢測端固定有酶分子的酶探頭，并以這種酶探頭對溶液中底物的催化反應為基礎(chǔ)構(gòu)建了掃描激光誘導熒光顯微術(shù)的負反饋掃描模式。這種對光纖進行修飾并可以對基底進行檢測的光學探頭，在其他的掃描探針顯微鏡中還未曾報道過。我們在光纖的端面上通過硅烷化的方法修飾了HRP分子制成可以