毛細(xì)管電泳激光誘導(dǎo)熒光檢測蛋白質(zhì).pdf

1、隨著后基因組時代的到來,生物研究的重心逐漸從DNA、RNA等遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)等功能物質(zhì)上來。蛋白質(zhì)組學(xué)研究,尤其是單細(xì)胞蛋白質(zhì)組研究對當(dāng)前的生物大分子分離、分析技術(shù)提出了新的要求。
　　毛細(xì)管電泳曾以其快速高效的特點極大的推動了人類基因組計劃的完成,并大大降低了開銷。而在蛋白質(zhì)分離分析領(lǐng)域,毛細(xì)管電泳又以其納升級的進(jìn)樣量,納摩爾級的檢測極限和極高的分辨率越來越發(fā)揮出難以取代的作用。
　　本文主要研究了基于毛細(xì)管電泳的高靈

2、敏度、高分辨率的蛋白質(zhì)分離、激光誘導(dǎo)熒光檢測系統(tǒng)的構(gòu)建以及標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)樣品毛細(xì)管電泳分離條件的摸索。本系統(tǒng)采用毛細(xì)管無膠篩分電泳模式,蛋白質(zhì)樣品在進(jìn)樣之前用FQ熒光發(fā)生試劑進(jìn)行衍生,得到具有熒光特性的蛋白質(zhì)-FQ衍生物。使用3萬伏高壓電源進(jìn)行電泳分離、蛋白質(zhì)-FQ衍生物在波長為488納米的氬離子激光誘導(dǎo)下產(chǎn)生熒光,熒光信號再通過濾鏡組被光電倍增管收集放大,濾波,通過數(shù)據(jù)采集程序采集,得到三種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的電泳圖譜。通過對圖譜中分離度、峰高和