2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、感染豬的附紅細(xì)胞體分為附紅細(xì)胞體和小附紅細(xì)胞體兩大類。而國內(nèi)還未見有關(guān)小附紅細(xì)胞體分離和動物感染試驗的報道。通過小附紅細(xì)胞體病原的分離鑒定及動物感染試驗,有助于了解小附紅細(xì)胞體的生物學(xué)特性及致病性。
  本試驗從上海地區(qū)2個屠宰場,采集豬抗凝血736份,提取血液基因組DNA作為模板,設(shè)計合成兩對特異性引物并驗證了具有高度敏感性和良好特異性,用兩對特異性的引物進行16s RNA基因部分序列的PCR擴增、克隆、序列測定及生物信息學(xué)分析

2、。結(jié)果顯示,在736份血樣中,豬源附紅細(xì)胞體陽性率為13.72%(101/756),其中小附紅細(xì)胞體陽性率為7.34%(54/736),豬附紅細(xì)胞體陽性率為4.76%(35/736),混合感染比例為1.63%(12/736),2個屠宰場3次采集的樣品陽性率差異極顯著(x2=132.841,P<0.001)。嘉定區(qū)某屠宰場3月份的陽性率為2.41%,5月份的陽性率為33.21%,5月份極顯著高于3月份(x2=81.484,P<0.001)

3、。
  在DNA擴增陽性血樣中,分別選取4份小附紅細(xì)胞體引物擴增產(chǎn)物和4份豬附紅細(xì)胞體引物擴增產(chǎn)物,亞克隆到pMD18-T載體后進行測序。小附紅細(xì)胞體擴增片段序列完全一致,長度均為483 bp,BLASTn軟件在線分析顯示所獲得序列與GenBank公布的小附紅細(xì)胞體Indiana株16S rRNA基因(登錄號:NR_121759)序列同源性達100%。豬附紅細(xì)胞體擴增片段序列也完全一致,長度均為482 bp,BLASTn軟件在線分

4、析顯示所獲得序列與GenBank公布的豬附紅細(xì)胞體Morioka5、6、8株16S rRNA基因(登錄號分別為:AB610847、AB610848、AB610849)和ZJ NB01株16SrRNA基因(登錄號:KC907396.1)序列同源性達100%,豬附紅細(xì)胞體擴增片段與小附紅細(xì)胞體擴增片段的同源性僅為93.6%。
  用小附紅細(xì)胞體陽性血樣通過肌肉注射方法接種廣西巴馬去脾仔豬,采集血樣進行特異性PCR檢測及序列分析。結(jié)果表

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