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1、豬附紅細(xì)胞體(Mycoplasma suis)是一種嗜血性支原體，豬附紅細(xì)胞體病的主要特點(diǎn)是導(dǎo)致母豬繁殖能力下降，仔豬生長速度減慢，還會與其他疾病發(fā)生交叉感染，給疾病的診斷帶來很大難度。
根據(jù)GenBank中豬附紅細(xì)胞體α-烯醇化酶基因序列，利用Primer5.0軟件設(shè)計(jì)合成了1對特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物連接到pMD-18T simple Vector后，再亞克隆到原核表達(dá)載體pGEX-4T-1和真核表達(dá)載體pVA
2、X1中，構(gòu)建了原核表達(dá)質(zhì)粒pGEX-4T-Eno和真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX-Eno。經(jīng)SDS-PAGE和Western blot，表明試驗(yàn)所表達(dá)蛋白相對分子量為69 ku,表達(dá)融合蛋白的反應(yīng)原性很好；真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX-Eno轉(zhuǎn)染Vero細(xì)胞后，經(jīng)過IFAT檢測，在Vero細(xì)胞中產(chǎn)生綠色熒光，表明α-烯醇化酶基因獲得瞬時(shí)表達(dá)。
純化豬附紅細(xì)胞體α-烯醇化酶基因重組蛋白，以此蛋白為抗原，建立豬附紅細(xì)胞體重組蛋白間接ELISA檢測方
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