青藏高原野生大麥HsCBL8基因在水稻中的表達及其耐鹽性分析.pdf

1、水稻是我國最重要的糧食作物之一，然而土壤鹽堿化嚴重影響水稻產量。運用現代育種技術培育耐鹽水稻新品種是應對土壤鹽堿化問題的重要手段，而野生種質資源開發(fā)對于現代育種具有重大的意義。青藏高原被證明是栽培大麥起源中心之一，具有豐富的野生大麥種質資源，能為農作物逆境脅迫抗性育種提供寶貴的基因資源。CBL家族蛋白是植物所特有的Ca2+感受蛋白，能與CIPK蛋白形成復合體，特異性解碼Ca2+信號，調控植物體響應逆境脅迫。本研究將野生大麥中耐鹽相關基因

2、HsCBL8導入到擬南芥和水稻中，以研究其在植物耐鹽生理中的作用。取得的主要成果如下:
　　1.比較了青藏高原一年生野生大麥XZ166(HsCBL8的來源)與栽培大麥CM72在鹽脅迫下的植株表型差異，Na+、K+含量及其比率，發(fā)現XZ166具有高度耐鹽性;熒光定量PCR證明XZ166中CBL8基因對鹽脅迫響應更加高效。
　　2.構建ProHsCBL8-GUS表達載體，導入擬南芥中，在外源ABA、鹽脅迫、干旱脅迫和冷脅迫處理條

3、件下，轉基因擬南芥GUS蛋白活性不同程度升高，表明HsCBL8受多種逆境誘導上調表達。
　　3.構建35S-HsCBL8超表達載體，通過農桿菌導入水稻品種ZH11，經過PCR、Southern雜交及反轉錄PCR驗證，獲得了目的基因單拷貝插入并且能穩(wěn)定表達的純合轉基因后代。
　　4.比較T3代轉基因水稻與野生型水稻在鹽脅迫(100mM NaCl)下植株表型和各項耐鹽生理數據，結果顯示轉基因水稻耐鹽性顯著高于野生型，證明外源Hs