基質(zhì)金屬蛋白酶及組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑在大腸癌中的表達研究.pdf

1、目的:大腸癌是中國最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率有逐年上升趨勢.大腸癌患者雖可經(jīng)過手術,化療、放療及其它綜合治療有一定的療效,但資料顯示,約有30﹪的思者仍在五年內(nèi)死于復發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移.因此,研究和探討大腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移機制成為目前研究的熱點.方法:隨機選取2001年8月至2001年12月在河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院行外科手術治療的30例大腸癌思者的腫瘤組織標本,并以距腫瘤邊緣10cm的正常粘膜作為對照,標本均于離體半小時內(nèi)采集,液氮速凍,后轉(zhuǎn)

2、至-80冰箱貯存待用.所有標本均經(jīng)病理證實.以異硫氰酸胍-酚-氯仿(acidguanidinium-phenol-chloroform,AGPC)一步法提取組織的總RNA應用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)技術擴增MMP-2、TIMP-2和MT1-MMP基因,同時擴增β-actin作為內(nèi)參照.擴增產(chǎn)物電泳后經(jīng)凝膠成像分析系統(tǒng)照相、分析,以電泳條帶上各產(chǎn)物的面積與灰度值的乘積作為積分光密度值,并將MMP-2、TIMP-2、MTI-M

3、MP與β-actin的積分光密度值的比值作為大腸癌中各產(chǎn)物的表達水平的參數(shù),運用X<'2>檢驗,t檢驗,方差分析,相關分析,多元逐步回歸,對數(shù)據(jù)進行分析和統(tǒng)計.結(jié)論:1.大腸癌組織中,MMP-2mRNA的表達率及表達水平均顯著高于正常組織,MMP-2mRNA的 表達水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Dukes分期密切相關.提示MMP-2在大腸癌的發(fā)生發(fā)展,特別是在腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮了重要作用,有可能成為預測大腸癌轉(zhuǎn)移潛能的臨床指標.2.在大腸癌

4、組織中,TIMP-2mRNA的表達水平與Dukes分期密切相關,說明TIMP-2有望成為監(jiān)測大腸癌浸潤和轉(zhuǎn)移的有用指標.3.在大腸癌組織中MMP-2/TIMP-2MMP-2mRNA 的表達水平均顯著高于正常組織,而TIMP-2mRNA的 表達水平在腫瘤組織及正常組織中無顯著差異,提示腫瘤組織中存在著MMP-2mRNA的過表達及TIMP-2mRNA的相對低表達.針對這一特點,在大腸癌的治療中,減少MMP-2的表達,或人工誘導TIMP-2的

5、表達,或給予類似TIMP-2結(jié)構(gòu)的桔抗藥物,有可能成為治療大腸癌的一個有效手段,為大腸癌的治療提供了一個新的思路.4.在大腸癌組織中,MT1-MMPmRNA的表達水平遠較正常組織為高,且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Dukes分期密切相關.提示MT1-MMP 的高表達在大腸癌對周圍組織的浸潤轉(zhuǎn)移過程中具有重要作用,可以作為反映大腸癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的生物學標志物;同時,早期阻斷MT1-MMP的表達可能會抑制腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移,從而成為大腸癌治療的一個新途徑.