海馬組織DNA放射損傷的NHEJ修復(fù)與放射性認(rèn)知損害的相關(guān)性研究.pdf

1、博士學(xué)位論文論文題目海馬組織DNA放射損傷的NHEJ修復(fù)與放射性認(rèn)知損害的相關(guān)性研究研究生姓名張力元指導(dǎo)教師姓名田野專業(yè)名稱腫瘤學(xué)研究方向腫瘤放射治療學(xué)論文提交日期2012年9月海馬組織DNA放射損傷的NHEJ修復(fù)與放射性認(rèn)知損害的相關(guān)性研究中文摘要I海馬組織DNA放射損傷的NHEJ修復(fù)與放射性認(rèn)知損害的相關(guān)性研究中文摘要研究背景和目的：研究背景和目的：放射治療是頭頸部及腦腫瘤的重要治療手段。由于解剖因素，治療上述腫瘤的同時(shí)將不可避免地

2、使正常腦組織受到照射，進(jìn)而產(chǎn)生認(rèn)知功能損害。有研究表明：腦內(nèi)DNA損傷未能得到有效修復(fù)可導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)疾病。DNA雙鏈斷裂是最嚴(yán)重的DNA損傷。在成熟神經(jīng)系統(tǒng)，DNA雙鏈斷裂主要通過(guò)非同源末端連接（NHEJ）方式修復(fù)。電離輻射引起的認(rèn)知損害主要是海馬依賴的認(rèn)知功能障礙，為此本課題中將研究被照射海馬組織DNA損傷的NHEJ修復(fù)與放射性認(rèn)知損害的相關(guān)性。研究方法和材料：研究方法和材料：1.照射模型照射模型將100只1月齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為5

3、組，即：空白對(duì)照組，麻醉對(duì)照組，2Gy，10Gy及20Gy組。3.6％水合氯醛腹腔內(nèi)注射麻醉后，通過(guò)直線加速器給予4MeV電子線全腦照射。此后監(jiān)測(cè)受照動(dòng)物的一般情況。2認(rèn)知檢測(cè)認(rèn)知檢測(cè)全腦照射后的第1、2個(gè)月進(jìn)行認(rèn)知功能測(cè)試。測(cè)試包括開(kāi)放場(chǎng)、Mris水迷宮和避暗檢測(cè)。2.1.開(kāi)放場(chǎng)檢測(cè)開(kāi)放場(chǎng)檢測(cè)將受試大鼠放入開(kāi)放場(chǎng)中央，并允許其自由走動(dòng)10min。通過(guò)視頻跟蹤器測(cè)量大鼠的移動(dòng)距離和中央?yún)^(qū)域駐留時(shí)間。2.2.Mris水迷宮測(cè)試水迷宮測(cè)試M

4、ris水迷宮測(cè)試中，在第1~4天進(jìn)行定位航行檢測(cè)，而第5天進(jìn)行空間探索測(cè)試。通過(guò)視頻跟蹤器測(cè)量潛伏期和各象限駐留時(shí)間。2.3.避暗檢測(cè)避暗檢測(cè)將大鼠放入明箱后，觀察進(jìn)入暗箱的時(shí)間。24小時(shí)后重復(fù)實(shí)驗(yàn)，記錄潛伏期。2.4.RealtimePCR分析分析取照射后2個(gè)月的新鮮海馬組織，使用Trizol試劑抽提總RNA，由mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA后使用染料結(jié)合法（SYBEGreen法）對(duì)XRCC4、XRCC5和XRCC6基因的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。