海馬組織DNA放射損傷的NHEJ修復與放射性認知損害的相關性研究.pdf

1、博士學位論文論文題目海馬組織DNA放射損傷的NHEJ修復與放射性認知損害的相關性研究研究生姓名張力元指導教師姓名田野專業(yè)名稱腫瘤學研究方向腫瘤放射治療學論文提交日期2012年9月海馬組織DNA放射損傷的NHEJ修復與放射性認知損害的相關性研究中文摘要I海馬組織DNA放射損傷的NHEJ修復與放射性認知損害的相關性研究中文摘要研究背景和目的：研究背景和目的：放射治療是頭頸部及腦腫瘤的重要治療手段。由于解剖因素，治療上述腫瘤的同時將不可避免地

2、使正常腦組織受到照射，進而產生認知功能損害。有研究表明：腦內DNA損傷未能得到有效修復可導致神經(jīng)系統(tǒng)疾病。DNA雙鏈斷裂是最嚴重的DNA損傷。在成熟神經(jīng)系統(tǒng)，DNA雙鏈斷裂主要通過非同源末端連接（NHEJ）方式修復。電離輻射引起的認知損害主要是海馬依賴的認知功能障礙，為此本課題中將研究被照射海馬組織DNA損傷的NHEJ修復與放射性認知損害的相關性。研究方法和材料：研究方法和材料：1.照射模型照射模型將100只1月齡雄性SD大鼠隨機分為5

3、組，即：空白對照組，麻醉對照組，2Gy，10Gy及20Gy組。3.6％水合氯醛腹腔內注射麻醉后，通過直線加速器給予4MeV電子線全腦照射。此后監(jiān)測受照動物的一般情況。2認知檢測認知檢測全腦照射后的第1、2個月進行認知功能測試。測試包括開放場、Mris水迷宮和避暗檢測。2.1.開放場檢測開放場檢測將受試大鼠放入開放場中央，并允許其自由走動10min。通過視頻跟蹤器測量大鼠的移動距離和中央?yún)^(qū)域駐留時間。2.2.Mris水迷宮測試水迷宮測試M

4、ris水迷宮測試中，在第1~4天進行定位航行檢測，而第5天進行空間探索測試。通過視頻跟蹤器測量潛伏期和各象限駐留時間。2.3.避暗檢測避暗檢測將大鼠放入明箱后，觀察進入暗箱的時間。24小時后重復實驗，記錄潛伏期。2.4.RealtimePCR分析分析取照射后2個月的新鮮海馬組織，使用Trizol試劑抽提總RNA，由mRNA逆轉錄成cDNA后使用染料結合法（SYBEGreen法）對XRCC4、XRCC5和XRCC6基因的表達水平進行檢測。