常山酮預(yù)防放射性肺損傷的研究.pdf

1、目的：研究常山酮對(duì)放射性肺損傷的預(yù)防作用，并探索其可能的機(jī)制。
　　方法：健康雌性C57BL/6J小鼠60只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、胸部照射組、常山酮用藥組及胸部照射聯(lián)合常山酮用藥組。對(duì)照組12只，不做任何處理；胸部照射組18只，給予全肺單次12Gy劑量的X線照射；聯(lián)合組18只，給予全肺單次12Gy劑量的X線照射，胸部照射前15天開(kāi)始每只小鼠常山酮灌胃25ug/0.2ml/d，胸部照射后繼續(xù)用藥15天；常山酮組12只，常山酮灌胃，灌

2、胃方法及時(shí)間同聯(lián)合組。胸部照射后24小時(shí)、1周、2周、4周、12周、20周胸部照射組及常山酮聯(lián)合胸部照射組分別隨機(jī)處死3只，對(duì)照組及常山酮組各2只，取新鮮肺組織，左肺固定蠟塊包埋切片行HE染色觀察肺組織形態(tài)、并行免疫組織化學(xué)法檢測(cè)TGF-β1表達(dá)水平；右肺凍存行羥脯氨酸堿水解法測(cè)定羥脯氨酸含量。免疫組化采用AB值定量記分法：A表示顯色深淺：0為無(wú)顯色，1為淺黃色，2為棕黃色，3為粽褐色；B為每個(gè)視野染色細(xì)胞比例：1為陽(yáng)性細(xì)胞<5％，2為

3、5％-35％，3為36％-65％，4為>65％。每張切片觀察5個(gè)高倍視野，計(jì)算AB值平均值作為該切片的最后評(píng)分。羥脯氨酸含量及免疫組化所測(cè)組織蛋白的表達(dá)結(jié)果采用方差分析，設(shè)定P<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著水平。
　　結(jié)果：肺組織HE染色結(jié)果示胸部照射組小鼠胸部照射后24小時(shí)肺泡水腫、出血，部分肺泡腔充滿粉染均質(zhì)水腫液，肺泡內(nèi)大量游離的中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞；胸部照射后1周仍可見(jiàn)明顯肺泡出血與水腫，肺泡塌陷，并可見(jiàn)到成纖維細(xì)胞；胸部照射

4、后2周肺泡炎癥表現(xiàn)較前有所減輕，成纖維細(xì)胞增生，肺泡間隔略增寬；胸部照射后4周肺泡腔縮小，肺泡間隔明顯增寬，可見(jiàn)大量成纖維細(xì)胞；胸部照射后12周肺泡腔明顯縮小，肺明顯形成纖維化，可見(jiàn)膠原纖維沉積，大量的成纖維細(xì)胞增生；胸部照射后20周肺泡結(jié)構(gòu)明顯破壞，可見(jiàn)肺實(shí)變。胸部照射聯(lián)合常山酮組小鼠各時(shí)間點(diǎn)肺泡炎癥及肺纖維化均較單純胸部照射組明顯減輕。常山酮組及對(duì)照組小鼠肺組織無(wú)明顯差別，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)未見(jiàn)明顯改變。單純胸部照射組及常山酮聯(lián)合胸部照射組

5、肺組織中TGF-β1各個(gè)時(shí)間點(diǎn)表達(dá)水平均明顯高于對(duì)照組及常山酮組(P<0.01)。單純胸部照射組肺組織中胸部照射后24小時(shí)、1周、2周、4周、12周、20周TGF-β1的表達(dá)水平均高于常山酮聯(lián)合胸部照射組(P=0.083、0.129、0.026、0.032、0.201、0.037)，以胸部照射后2周時(shí)差別最為明顯；對(duì)照組及常山酮組弱陽(yáng)性表達(dá)，兩組之間無(wú)明顯差異(P>0.1)。胸部照射組及聯(lián)合組羥脯氨酸含量均隨時(shí)間延長(zhǎng)升高，對(duì)照組及常山酮

6、組羥脯氨酸含量隨時(shí)間變化不明顯。聯(lián)合組羥脯氨酸含量在胸部照射后24小時(shí)、1周、2周、4周、12周有低于胸部照射組的趨勢(shì)(P=0.248、0.343、0.408、0.365、0.076)，胸部照射后20周聯(lián)合組羥脯氨酸含量低于胸部照射組(P=0.037)；對(duì)照組與常山酮組相比肺組織中羥脯氨酸含量無(wú)明顯差異(p>0.5)。
　　結(jié)論：常山酮可以抑制胸部照射后小鼠肺組織炎性及纖維化改變，其機(jī)制有可能為降低胸部照射后TGF-β1的表達(dá)，常