前列康泰方對慢性前列腺炎大鼠前列腺組織細胞因子的調控作用研究.pdf

1、目的：探討慢性前列腺炎的基本病機，從細胞信號因子角度研究慢性前列腺炎的病理機制，初步闡明中藥前列康泰方治療慢性細菌性、非細菌性前列腺炎的作用及其機制，初步揭示慢性前列腺炎“肝實腎虛”病機理論的科學內涵。 方法： 1.觀察前列康泰方對巴豆油所致小鼠耳廓腫脹的抑制作用和對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的抑制作用。 2.觀察前列康泰方對慢性細菌性和非細菌性前列腺炎大鼠前列腺組織形態(tài)學的影響。本實驗共分兩大部分進行：

2、①制造慢性細菌性前列腺炎模型：取45只大鼠麻醉，無菌條件下切開下腹部皮膚和肌層，于前列腺兩側葉注入預先稀釋好的濃度為107～109個/ml大腸桿菌混懸液0.2ml，最后縫合腹壁肌層和皮膚。將已做手術的45只大鼠隨機分為慢性細菌性前列腺炎模型組、左氧氟沙星組和前列康泰方組，每組15只。 ②制造慢性非細菌性前列腺炎模型：將45只大鼠麻醉，無菌條件下切開下腹部皮膚和肌層，于前列腺兩側葉注入25％消痔靈注射液0.2ml，最后縫合腹壁肌層

3、和皮膚。將已做手術的45只大鼠隨機分為慢性非細菌性前列腺炎模型組、前列康組和前列康泰方組，每組15只。另外取15只正常wistar大鼠，無菌條件下切開下腹部皮膚和肌層，于前列腺兩側葉注入無菌生理鹽水0.2ml，做為兩個實驗共用的正常對照組(假手術組)。造模7天后開始給藥，各實驗組大鼠分別給予相應藥物，每天灌胃2次，連續(xù)5周，光鏡下觀察各組大鼠前列腺組織形態(tài)學的變化。 3.透射電鏡下觀察前列康泰方對慢性細菌性和非細菌性前列腺炎大鼠

4、前列腺組織細胞超微結構的影響。 4.用放射免疫法檢測各組大鼠血漿TXB2、6-K-PGF1α含量的變化。 5.用雙抗體夾心酶聯免疫分析法(ELISA)檢測各組大鼠前列腺組織中細胞因子TNF-α、IL-1β水平的變化。 6.用逆轉錄-聚合酶鏈反應法(RT-PCR)檢測各組大鼠前列腺組織TNF-α、IL-1β mRNA表達水平的變化。 結果： 1.前列康泰方對巴豆油所致小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠所致大鼠足

5、跖腫脹有明顯的抑制作用(P<0.05)。 2.光鏡下大鼠前列腺組織形態(tài)學改變：慢性細菌性和非細菌性前列腺炎模型組前列腺腺泡上皮細胞分泌功能降低，腺腔及間隙有炎性細胞浸潤，有纖維細胞增生和血管增生，病理損害明顯。前列康泰方組前列腺腺泡上皮細胞分泌增多，間質炎性細胞浸潤和纖維細胞增生明顯減輕。 3.透射電鏡下大鼠前列腺組織細胞超微結構的變化：慢性細菌性和非細菌性前列腺炎模型組前列腺腺泡上皮細胞胞漿中粗面內質網中度擴張，線粒體

6、腫脹，細胞間質膠原纖維明顯增生。前列康泰方組前列腺腺泡上皮細胞胞漿中可見豐富的粗面內質網，排列整齊，內質網輕度擴張，線粒體腫脹明顯減輕。 4.慢性細菌性和非細菌性前列腺炎大鼠血漿TXB2和6-Keto-PGF1α含量的變化：與正常對照組比較，兩個模型組大鼠血漿TXB2水平均升高、6-Keto-PGF1α水平均降低(P<0.05)，TXB2/6-Keto-PGF1α比值顯著性升高(P<0.01)。與模型組比較，前列康泰方組血漿TX

7、B2水平降低、6-Keto-PGF1α水平升高(P<0.05)，TXB2/6-Keto-PGF1α比值顯著性下降(P<0.01)。 5.慢性細菌性和非細菌性前列腺炎大鼠前列腺組織中細胞因子TNF-α、IL-1β水平的變化：與正常對照組比較，兩個模型組大鼠前列腺組織中細胞因子TNF-α、IL-1β水平均升高(P<0.05)；與模型組比較，前列康泰方組大鼠前列腺組織中細胞因子TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05)。

8、6.慢性細菌性和非細菌性前列腺炎大鼠前列腺組織中TNF-α、IL-1 β mRNA表達水平的變化：與正常對照組比較，兩個模型組大鼠前列腺組織中TNF-αIL-1β mRNA表達水平均增強(P<0.05)；與模型組比較，前列康泰方組大鼠前列腺組織TNF-α、IL-1β mRNA表達水平降低(P<0.05)。 結論　本課題提出了慢性前列腺炎實證多責之于肝，虛證多責之于腎，“肝實腎虛”是慢性前列腺炎的病機特點，“濁瘀阻滯”是慢性前列腺

9、炎纏綿難愈的癥結所在。通過本實驗研究發(fā)現，前列康泰方能使實驗動物炎癥反應減輕，有明顯的抗炎作用；使慢性細菌性和非細菌性前列腺炎大鼠光鏡和電鏡下前列腺組織的炎性病理損害明顯減輕。慢性細菌性和非細菌性前列腺炎模型組大鼠血漿TXB2水平較正常對照組均顯著升高，6-keto-PGF1α水平均顯著降低，致使TxB2/6-Keto-PGF1α比值明顯升高，說明慢性前列腺炎確實存在“濁瘀阻滯”；而前列康泰方可降低大鼠血漿TXB2水平，升高6-Keto

10、-PGF1α水平，使TXB2/6-Keto-PGF1α比值顯著性下降，說明前列康泰方能改善大鼠血瘀的狀況，這可能是該方治療慢性前列腺炎的作用機制之一。慢性細菌性和非細菌性前列腺炎模型組大鼠前列腺組織中細胞因子TNF-α、IL-1β水平均顯著升高，TNF-α、IL-1βmRNA表達也增強，說明慢性前列腺炎確實存在異常免疫反應；而且機體出現的這種異常免疫反應可能是慢性細菌性和非細菌性前列腺炎的共同發(fā)病機制。前列康泰方能使大鼠前列腺組織中細胞