甘藍型油菜不同CMS的遺傳標記及RT-PCR研究.pdf

1、油菜是一種重要的油料作物。油菜雜種優(yōu)勢利用，超高產(chǎn)及強優(yōu)勢組合篩選越益引起了各國政府和育種家的重視。目前我國主要利用細胞質雄性不育系生產(chǎn)雜交油菜品種。因此，選育新型細胞質類型的甘藍型油菜雄性不育系，對于我國雜交油菜生產(chǎn)發(fā)展具有重要意義。本研究在花器形態(tài)、酯酶同工酶、EST-SSR．標記和RAPD標記分析及CMS相關基因RNA表達方面對國內重要的甘藍型油菜細胞質雄性不育類型Xin1系統(tǒng)、Ogu系統(tǒng)、Pol系統(tǒng)和Shan 2A系統(tǒng)、保持系、

2、恢復系以及國內主要的常規(guī)品種進行比較分析，為高產(chǎn)、優(yōu)質雜交油菜的選育提供重要的參考依據(jù)。其主要研究結果如下： 1.觀察開花期的花器形態(tài)，比較不同不育系及保持系的雌蕊授粉情況，對選育雜交油菜具有重要意義。Xin1、Ogu和Shan2A CMS的雄蕊明顯短于柱頭長，花絲不伸長或略有伸長，花藥萎縮，花粉微量，表現(xiàn)出明顯不育性。Pol CMS在花器形態(tài)上與保持系B355沒有顯著性差異，但花粉囊呈中空干癟，有少量花粉，花粉量遠遠小于B35

3、5。此外Xin1 CMS花瓣明顯皺縮，六個雄蕊不完整或心皮化現(xiàn)象，花粉囊中空干癟，表現(xiàn)為花器形態(tài)上比較理想的不育材料?；ㄝ鄬捠俏ㄒ灰粋€各材料間不存在差異的性狀。 2.采用聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳法，對甘藍型油菜的4個細胞質雄性不育系及其保持系的嫩葉片進行了酯酶同工酶分析，結果表明：6個共同酶帶，3個差異酶帶。其中除Xinl CMS只有一條遷移率為0.77的較強，其他4個材料均具有一條遷移率為0.74的酶帶。此外，Pol和Shan

4、2A還有遷移率為0.77的強譜帶和遷移率為0.86的一條較弱譜帶。而Ogu CMS和B355都只有遷移率為0.74的特異性譜帶。不同不育系及保持系之間酯酶同工酶在酶帶數(shù)量和活性上都存在差異。 3.采用EST-SSR和RAPD兩種分子標記技術，檢測甘藍型油菜4份不育系、3份保持系、10份恢復系和11份常規(guī)品種共35個材料的遺傳多樣性及與雜種優(yōu)勢的關系。結果共檢測到399個等位位點，其中130個等位變異，占總檢測位點的32.57％。

5、NTSYS軟件聚類分析結果表明：35份材料遺傳距離范圍為0.0280-0.2801，在遺傳距離(GD)0.1401下分為6類，Ogu、Polima和Shan 2A CMS聚在第V類，與Xin1 CMS遺傳距離較遠；不育系間的遺傳差異比不育系與保持系、恢復系及常規(guī)品種之間小，基本反映了品種(系)的遺傳基礎和系譜來源。 4.根據(jù)油菜CMS的相關基因orf224、orf222、orf138設計6對特異引物，對Pol、Shan2A、Og