甘藍型油菜抗菌核病的遺傳研究.pdf

1、油菜菌核病是造成油菜嚴重減產(chǎn)的主要病害之一。盡管很多科學家對菌核病進行了廣泛而深入的研究，但有關該方面的進展卻差強人意。以本研究室現(xiàn)有的資源為基礎，探討油菜菌核病的研究方法，發(fā)掘抗病資源，將為后期抗菌核病育種利用和相關基因的分離、克隆奠定基礎。 本研究包括三個方面的內(nèi)容，即通過PCR、Southernblotting分子鑒定和抗生素篩選三種方法對轉(zhuǎn)基因甘藍型油菜的后代株系進行了鑒定；通過草酸毒素法和離體葉片接種核盤菌法鑒定幾個甘

2、藍型油菜品種(系)的抗病特性；利用TN群體(由Tapidor×寧油7號雜種一代建立的DH群體，共包含202個株系)，進行油菜抗菌核病QTLs定位。 本研究的主要結(jié)果如下：1)轉(zhuǎn)基因材料分子鑒定轉(zhuǎn)AP24-Glu基因株系的PCR檢測結(jié)果為：NPTⅡ引物特異性擴增后代株系，兩年的結(jié)果均顯示陽性；而以AP24、35S、35S-AP24特異引物篩選轉(zhuǎn)AP24-Glu基因的后代株系，結(jié)果均顯示陰性。Southernblotting檢測結(jié)果

3、為：利用NPTⅡ，AP24和35S序列作為探針沒有篩選到陽性株系。 轉(zhuǎn)Chi-Oxo基因株系的PCR檢測結(jié)果：NPTⅡ引物擴增后代株系DNA混合樣，兩年的結(jié)果均為陽性；Southernblotting檢測結(jié)果：利用NPTⅡ基因序列作為探針，只有一個轉(zhuǎn)基因株系為陽性。 利用卡那霉素篩選轉(zhuǎn)基因后代種子，兩種轉(zhuǎn)基因材料均不抗卡那霉素。 2)常規(guī)品種的草酸抗性鑒定和核盤菌抗性分析品種間的草酸抗性和核盤菌抗性差異是顯著的，

4、其中表現(xiàn)為高度抗草酸毒素的品種有Tapidor、恢5200、中油821、6-203；表現(xiàn)高感草酸的材料為湘油15、寧油7號、寧RS-1、華雙3號?？咕瞬≥^好的品種有Tapidor和6-203；Westar表現(xiàn)最為感病。不同品種對核盤菌抗性和對草酸抗性的相關性不同。 3)利用TN群體進行抗病相關QTLs定位在已有的高密度遺傳圖譜的基礎上，利用WinQTLCart2.0作圖軟件進行QTLs掃描，共檢測到19個抗菌核病相關QTLs，