血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度與DMD骨骼肌纖維化的關(guān)系.pdf

1、目的:通過檢測杜氏型肌營養(yǎng)不良(Duchenne muscular dystrophy, DMD)患者血清中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、金屬蛋白酶組織抑制劑-1(TIMP-1)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)的水平及腓腸肌中纖維化程度，探討血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1與DMD骨骼肌纖維化的關(guān)系。
　　 方法:收集2011年1月至2012年6月就診于深圳市兒童醫(yī)院神經(jīng)肌肉病?？频奈唇?jīng)藥物治療的DMD/BMD

2、患兒的腓腸肌組織及非抗凝血，正常兒童的非抗凝血。其中DMD組42例（6.55±2.72歲），BMD組8例（8.80±4.17歲），正常對照組18例（8.07±3.86歲）。DMD組又根據(jù)年齡分為3組，其中0～4歲組13例（3.48±0.28歲）、5～9歲組21例（6.83±0.94歲）、＞9歲組8例(10.81±0.93歲)。對腓腸肌肌組織冰凍后保存。冰凍組織行HE染色觀察骨骼肌基本病理改變，Masson染色觀察骨骼肌纖維化程度，免疫組

3、織化學(xué)鏈霉素抗生物素蛋白過氧化物酶連結(jié)(SP)法觀察MMP-9、TIMP-1、TGF-β1在肌肉組織中的分布情況。非抗凝血行ELISA法測血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度測定。
　　 結(jié)果:(1)HE染色、Masson染色示:DMD組骨骼肌中可見纖維組織增生，其中0～4歲組DMD患者骨骼肌纖維組織增生不明顯，5～9歲組DMD骨骼肌纖維組織增生明顯，＞9歲組DMD骨骼肌纖維組織增生明顯，且肌纖維數(shù)量明顯減少。BMD對

4、照組未見明顯纖維組織增生。(2)纖維化程度:DMD組纖維化程度比BMD組高(P＜0.05)。在DMD患者中，0～4歲組、5～9歲組、＞9歲組兩兩比較，纖維化程度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且纖維化程度與患兒年齡成正相關(guān)(r=0.694，P＜0.05)。(3) MMP-9、TIMP-1、TGF-β1存在于DMD骨骼肌中，且在巨噬細(xì)胞浸潤的部位表達(dá)增強(qiáng)。在DMD骨骼肌中可見較多成纖維細(xì)胞。(4)血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1

5、濃度:DMD組、BMD對照組與正常對照組相比，血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度均升高，且DMD組升高最明顯，三組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。(5)在DMD患者中，5～9歲組、＞9歲組與0～4歲組相比，血清MMP-9濃度降低(P＜0.05)，5～9歲組與＞9歲組相比，血清MMP-9濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);DMD患者5～9歲組與0～4歲組、＞9歲組相比，血清TIMP-1、TGF-β1濃度均升高(P＜0

6、.05)，0～4歲組與＞9歲組相比，血清TIMP-1、TGF-β1濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。(6)9歲前的DMD患者，血清MMP-9(r=0.6118，P＜0.05)、TIMP-1（r=0.6086，P＜0.05）、TGF-β1（r=0.6512，P＜0.05）濃度分別與年齡成正相關(guān);＞9歲DMD患者血清MMP-9（r=0.011，P＞0.05）、TIMP-1(r=0.209，P＞0.05)、TGF-β1(r=0.4588，

7、P＞0.05)濃度與年齡無線性相關(guān)。
　　 結(jié)論:(1) DMD患者骨骼肌纖維化程度隨年齡的增加而增加。(2) DMD患者與BMD患者、健康兒童比較，血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度升高。(3)在DMD患者9歲之前，血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度隨年齡的增加、纖維化程度的加重而升高。(4)血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度在一定程度上反映了DMD病情變化，可能是評估DMD病情變化及DMD