TGF-β-,1-在失神經(jīng)骨骼肌中的表達(dá)及其致肌纖維化作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究神經(jīng)損傷后其支配的骨骼肌內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforminggrowth factor-β1，TGF-β1)及I型膠原(collagen type I,COL I)的表達(dá)規(guī)律，以及應(yīng)用抗體阻斷TGF-β1 后骨骼肌內(nèi)COL I的表達(dá)變化，從而了解TGF-β1在骨骼肌失神經(jīng)纖維化過程中的生物學(xué)作用。
　　 方法：應(yīng)用小鼠坐骨神經(jīng)損傷模型,取失神經(jīng)支配的腓腸肌為材，免疫組化染色定位檢測TGF-β1表達(dá)；實(shí)時(shí)熒光定量

2、PCR技術(shù)檢測TGF-β1和COL I基因表達(dá)變化；免疫印跡法檢測TGF-β1和COL I蛋白表達(dá)的變化。應(yīng)用TGF-β1 多克隆抗體局部腓腸肌內(nèi)注射，檢測以上指標(biāo)的表達(dá)改變。
　　 結(jié)果：坐骨神經(jīng)損傷后，腓腸肌內(nèi)TGF-β1基因迅速表達(dá)上調(diào),7天時(shí)達(dá)高峰，其蛋白的表達(dá)約于術(shù)后14 天達(dá)高峰，隨后緩慢下降，術(shù)后42 天時(shí)仍有較顯著表達(dá)；腓腸肌內(nèi)COL I基因表達(dá)上調(diào)，約于術(shù)后28 天達(dá)高峰，其蛋白呈持續(xù)表達(dá)增加；而應(yīng)用抗體阻斷T