肉兔MDFI基因和PHB2基因的多態(tài)性及其與生產(chǎn)性狀的相關(guān)性.pdf

1、因?yàn)閷?duì)于兔肉的需求逐年增加，常規(guī)的育種技術(shù)對(duì)生長(zhǎng)性狀和肉質(zhì)性狀的遺傳改良有限，所以尋找其主效基因和遺傳標(biāo)記對(duì)提高肉兔生長(zhǎng)和肉品質(zhì)具有重要意義。肌分化抑制因子(MDFI)基因和抑制素2(PHB2)基因是與動(dòng)物生產(chǎn)性狀有關(guān)的兩個(gè)重要基因，為了提高這些性狀，本研究旨在尋找MDFI基因和PHB2基因的SNP位點(diǎn)以輔助分子選擇標(biāo)記。試驗(yàn)以青島康大兔業(yè)發(fā)展有限公司和山東農(nóng)業(yè)大學(xué)聯(lián)合培育的肉兔7個(gè)專門化品系為試驗(yàn)材料，其中雄兔171只，雌兔168只，

2、共計(jì)339只，作為試驗(yàn)材料進(jìn)行混池測(cè)序，PCR-SSCP單鏈構(gòu)象多態(tài)和限制性內(nèi)切酶酶切分析，根據(jù)兩個(gè)基因的基因型頻率計(jì)算各群體的基因頻率，并采用SAS軟件最小二乘法分析其對(duì)生產(chǎn)性狀的影響。主要結(jié)果如下:
　　(1)MDFI基因:本研究對(duì)肉兔MDFI的調(diào)控區(qū)和全部序列設(shè)計(jì)引物后，進(jìn)行擴(kuò)增混池測(cè)序及PCR-SSCP分析發(fā)現(xiàn)該基因有4個(gè)SNPS，G4010A，T5874C，A6400G和C10732T，并且每一個(gè)位點(diǎn)都有三種基因型。經(jīng)x

3、2檢驗(yàn)不同性別群體發(fā)現(xiàn)，G4010A，A6400G和C10732T位點(diǎn)的基因型分布達(dá)到Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P＞0.05），而T5874C位點(diǎn)的基因型偏離了Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P＜0.05)。
　　在雄性群體中，MDFI基因G4010A與70天體重、背腰最長(zhǎng)肌PH值、系水力、滴水損失、蒸煮損失、水分含量和灰分含量差異顯著(P＜0.05)，C10732T位點(diǎn)的三種基因型與70天體重、70天體長(zhǎng)、70

4、天體尺的差異顯著(P＜0.05);在雌性群體中，MDFI基因G4010A與背腰最長(zhǎng)肌PH值，T5874C與肌內(nèi)脂肪含量，6400位點(diǎn)與灰分含量、肌內(nèi)脂肪含量具有顯著相關(guān)性(P＜0.05)。
　　(2)PHB2基因:本研究對(duì)PHB2基因全部序列進(jìn)行了擴(kuò)增混池測(cè)序及PCR-SSCP分析發(fā)現(xiàn)該基因四個(gè)突變位點(diǎn)A678C、C2653T、A3004G和G3048A。其中A678C位點(diǎn)只有兩種基因型，C2653T、A3004G和G3048A有

5、三種基因型。經(jīng)x2檢驗(yàn)兩種性別群體發(fā)現(xiàn)所有位點(diǎn)的基因型分布達(dá)到偏離了Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P＜0.05)。在雄性群體中，PHB2基因A678C位點(diǎn)與肌肉蛋白含量差異顯著(P＜0.05)，PHB2基因C2653T位點(diǎn)與70天體重、84天體重、水分含量具有顯著相關(guān)性(P＜0.05)，PHB2基因G3048A位點(diǎn)與70天體重、70天體尺具有顯著相關(guān)性(P＜0.05);在雌性群體中，PHB2基因C2653T與30天體重，A300

6、4G與背腰最長(zhǎng)肌PH、熟肉率，G3048A與30天體重有顯著相關(guān)性(P＜0.05)。
　　(3)MDFI和PHB2基因不同基因型公兔個(gè)體的表達(dá)情況，在背腰最長(zhǎng)肌，MDFI基因中G4010A，A6400G，C10732T位點(diǎn)三種基因型的RNA表達(dá)量差異顯著(P＜0.05);在后腿肌，MDFI基因的G4010A位點(diǎn)的三種基因型的RNA表達(dá)量差異顯著(P＜0.05);在背腰最長(zhǎng)肌中，PHB2基因的四個(gè)突變位點(diǎn)中，只有C2653T位點(diǎn)的三

7、種基因型RNA表達(dá)量差異顯著(P＜0.05);在后腿肌中，PHB2基因的所有位點(diǎn)的基因型的RNA表達(dá)量差異均不顯著(P＞0.05)。
　　(4)在背腰最長(zhǎng)肌中，肉兔的30日齡與60日齡、90日齡、120日齡，120日齡天與60日齡、90日齡、120日齡個(gè)體的MDFI的表達(dá)量差異顯著(P＜0.05)。肉兔的30日齡與60日齡、90天日齡、160日齡，120日齡與60日齡、90天日齡、160日齡之間PHB2基因的表達(dá)量存在顯著差異(P