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1、目的: 觀察子癇前期患者和正常妊娠孕婦巨噬細(xì)胞增殖,分泌和吞噬情況,研究巨噬細(xì)胞在子癇前期發(fā)病機(jī)制中的作用,探討脂氧素對(duì)子癇前期患者巨噬細(xì)胞功能的影響,為該病的防治開(kāi)拓新的思路。 方法: 1、將溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院產(chǎn)科2007年3月至2007年7月收治的24例子癇前期患者腹腔巨噬細(xì)胞(子癇前期組)和24例正常孕婦腹腔巨噬細(xì)胞(正常妊娠組)體外分離,經(jīng)過(guò)貼壁分選培養(yǎng)后,采用CD14+單克隆抗體通過(guò)流式細(xì)胞儀鑒定細(xì)
2、胞純度。 2、用細(xì)胞生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)(MTT法)檢測(cè)不同濃度脂氧素A4(0nmol/L:10nmol/L;100nmol/L)作用24h后兩組巨噬細(xì)胞的增殖抑制率。 3、用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),測(cè)定不同濃度脂氧素A4(0nmol/L;10nmol/L;100nmol/L)作用48h后兩組培養(yǎng)上清液中腫瘤壞死因子(TNF-α)的水平。 4、用墨汁吞噬實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度脂氧素A4(0nmol/L;10nmol/L;
3、100nmol/L)作用24h后兩組巨噬細(xì)胞吞噬功能的變化。 5、用SPSS12.0軟件對(duì)資料進(jìn)行分析,P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果: 1、兩組巨噬細(xì)胞體外分離,貼壁分選培養(yǎng)2h,采用CD14+單克隆抗體通過(guò)流式細(xì)胞儀鑒定細(xì)胞純度約為80%。 2、兩組巨噬細(xì)胞增殖能力比較:子癇前期組不同濃度脂氧素A4(0nmol/L;10nmol/L;100nmol/L)作用下增殖抑制率分別為(14.8±6.
4、3)%,(32.9±3.6)%,(36.7±3.8)%。正常妊娠組不同濃度脂氧素A4(0nmol/L;10nmol/L;100nmol/L)作用下增殖抑制率分別為(16.8±6.9)%,(16.7±5.4)%,(15.9±2.1)%。子癇前期組增殖水平較正常妊娠組明顯增強(qiáng)(P<0.05),而脂氧素A4可明顯抑制子癇前期組增殖,呈劑量依賴性(P<0.05)。其對(duì)正常妊娠組增殖則無(wú)明顯影響(P>0.05)。 3、兩組巨噬細(xì)胞分泌功能
5、比較:子癇前期組不同濃度脂氧素A4(0nmol/L;10nmol/L;100nmol/L)作用下TNF-α水平分別為(1867.5±47.3)ng/L,(1836.9±4.5)ng/L,(1800.5±2.7)ng/L。正常妊娠組不同濃度脂氧素A4(0nmol/L;10nmol/L;100nmol/L)作用下TNF-α水平分別為(791.3±62.2)ng/L,(789.4±2.3)ng/L,(781.5±1.9)ng/L。子癇前期組T
6、NF-α水平顯著高于正常妊娠組(P<0.05),而脂氧素A4可抑制子癇前期組TNF-α水平,呈劑量依賴性(P<0.05)。其對(duì)正常妊娠組TNF-α水平無(wú)明顯影響(P>0.05)。 4、兩組巨噬細(xì)胞吞噬能力比較:子癇前期組不同濃度脂氧素A4(0nmol/L;10nmol/L;100nmol/L)作用下墨汁吞噬率分別為(17.8±2.3)%,(40.9±3.6)%,(45.7±3.8)%。正常妊娠組不同濃度脂氧素A4(0nmol/L
7、;10nmol/L;100nmol/L)作用下墨汁吞噬率分別為(67.3±5.9)%,(67.7±5.4)%,(65.9±2.1)%。子癇前期組吞噬水平較正常妊娠組明顯降低(P<0.05)。脂氧素A4可明顯增強(qiáng)子癇前期組吞噬能力,且呈劑量依賴性(P<0.05)。其對(duì)正常妊娠組吞噬能力則無(wú)明顯影響(P>0.05)。 結(jié)論: 重度子癇前期患者體內(nèi)活化的巨噬細(xì)胞數(shù)量顯著增加,過(guò)度分泌炎性細(xì)胞因子如TNF-α及吞噬能力顯著降低等
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