應(yīng)用分子標(biāo)記技術(shù)分析禾本科牧草的物種關(guān)系.pdf

1、我國(guó)是世界上牧草種質(zhì)資源最豐富的國(guó)家之一，分子標(biāo)記技術(shù)的興起和發(fā)展有力地推動(dòng)了牧草研究的進(jìn)程。 本研究采用改良的CTAB法提取禾本科種質(zhì)基因組DNA。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，改良的CTAB法提取的DNA純度和產(chǎn)量高。 利用37對(duì)ACGM引物對(duì)55份禾本科種質(zhì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，共擴(kuò)增出569條譜帶，皆為多態(tài)性條帶。對(duì)12份臂形草屬種質(zhì)進(jìn)行ACGM-PCR擴(kuò)增，共產(chǎn)生126條譜帶，37對(duì)引物中，有30對(duì)引物可以在至少1份材料中得到特異性

2、PCR產(chǎn)物。在獲得特異性產(chǎn)物的30對(duì)引物中，有27對(duì)引物獲得多態(tài)產(chǎn)物。 ACGM標(biāo)記聚類(lèi)分析表明：糖蜜草和兩份尾稃草間遺傳距離相對(duì)較近，其余引進(jìn)種質(zhì)都能在各自屬內(nèi)聚為一小類(lèi)。在閾值為0.20時(shí)，可將55份種質(zhì)劃分為A類(lèi)群(包括13個(gè)屬)及3個(gè)小類(lèi)。對(duì)12份臂形草屬種質(zhì)ACGM聚類(lèi)分析表明，巴拉草和濕生臂形草各為一類(lèi)，其余10份種質(zhì)聚成類(lèi)群A。 本研究對(duì)12份臂形草種質(zhì)進(jìn)行ISSR-PCR，在17條引物中共擴(kuò)增出286條譜

3、帶，其中280條具多態(tài)性，各種質(zhì)之間的遺傳相似系數(shù)為0.486～0.968；利用16條ISSR引物對(duì)8份黍?qū)俜N質(zhì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，共擴(kuò)增出152條譜帶，其中146條具有多態(tài)性，種質(zhì)之間的遺傳相似系數(shù)為0.487～0.803。種質(zhì)問(wèn)的特異性分析表明：研究選用的17條ISSR引物不能將此12份臂形草種質(zhì)區(qū)分開(kāi)；選用3條引物可以將這8份黍?qū)俜N質(zhì)區(qū)分開(kāi)。 12份臂形草種質(zhì)ISSR聚類(lèi)分析表明，在遺傳相似系數(shù)為0.585的水平上可將這12份