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1、磷是森林植被生長(zhǎng)所必需的大量元素之一,其需求量?jī)H次于氮。而土壤酸化引起的活性鋁數(shù)量增多是土壤有效磷含量降低的主要原因之一。土壤有效磷的缺乏,嚴(yán)重限制了植物的正常生長(zhǎng)。優(yōu)良的外生菌根真菌(ECMF)可與大多數(shù)林木形成共生體,在提高植物抗鋁毒能力,促進(jìn)植物對(duì)養(yǎng)分元素特別是磷的吸收方面表現(xiàn)突出。試驗(yàn)選取了3種不同的ECMF—彩色豆馬勃(Pisolithus tinctorius715,簡(jiǎn)稱Pt715)、松乳菇的兩個(gè)株系(Lactarius d
2、eliciosus2,簡(jiǎn)稱Ld2;Lactarius deliciosus3,簡(jiǎn)稱Ld3)為研究對(duì)象,在液體純培養(yǎng)條件下,研究了酸鋁脅迫下難溶性磷對(duì)ECMF的生長(zhǎng)、氮磷鋁吸收、無(wú)機(jī)磷形態(tài)、抗氧化酶活性的影響,以及進(jìn)行了菌株吸收鋁、磷的動(dòng)力學(xué)研究,以篩選出對(duì)難溶性磷利用效率高的優(yōu)良ECMF,同時(shí)探索ECMF對(duì)難溶性磷的活化作用及機(jī)理,為我國(guó)酸性富鋁林地上的植被修復(fù)提供理論和實(shí)踐依據(jù)。具體的研究結(jié)果如下:
(1)3種供試菌株均能耐
3、受酸鋁脅迫,且Fe-P處理對(duì)菌絲體生長(zhǎng)的促進(jìn)效果最明顯。其中,Ld2表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐鋁性,在P0、Na-P、Fe-P和Al-P4種處理下菌絲生物量均顯著增加( P<0.05),且增幅分別為Fe-P(22.31%)>P0(15.87%)>Na-P(8.87%)>Al-P(6.91%);Pt715的菌絲生物量在Na-P、Fe-P、Al-P處理下顯著增加,且Fe-P(32.84%)>Na-P(15.35%)>Al-P(7.66%);Ld3的菌絲
4、生物量在Na-P和Fe-P處理下顯著增加,且Fe-P(17.19%)>Na-P(14.06%)。鋁脅迫時(shí),難溶性Fe-P、Al-P、Na-P處理下的菌株生長(zhǎng)均好于P0處理,且Fe-P效果最好,Al-P次之,Na-P最小。3種菌株中,生物量高低依次為L(zhǎng)d2>Ld3>Pt715,即Ld2在酸鋁脅迫下各種磷處理中的生長(zhǎng)速度均優(yōu)于Ld3和Pt715。
?。?)3種菌株使培養(yǎng)液的pH值降低,但鋁脅迫下pH升高。鋁脅迫時(shí),F(xiàn)e-P和Al-P
5、處理下的菌液pH值均小于Na-P,推測(cè)ECMF可能通過(guò)分泌H+或有機(jī)酸溶解難溶性Fe-P和Al-P、絡(luò)合Al3+、調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境的pH值來(lái)達(dá)到抗鋁解磷作用。
?。?)Fe-P和Al-P均促進(jìn)菌絲體對(duì)鋁、總磷、Fe-P、Al-P的吸收,但抑制對(duì)氮的吸收。酸鋁脅迫下菌株對(duì)氮、鋁、總磷及Al-P的吸收增加。無(wú)鋁時(shí),3種菌株在Fe-P處理下菌絲體中Fe-P含量最高,但鋁脅迫卻使其顯著降低,而且各菌株在4種磷源處理下均為Al-P含量及占比最
6、高,推測(cè)鋁可能競(jìng)爭(zhēng)鐵的吸附位點(diǎn)且與磷結(jié)合有優(yōu)先選擇性,進(jìn)而使Fe-P化合物或其他磷形態(tài)含量降低。3種菌株中,菌絲體內(nèi)含磷量高低依次為L(zhǎng)d3>Ld2>Pt715,即Ld3對(duì)磷的利用能力強(qiáng)于Ld2和Pt715。
(4)酸鋁脅迫顯著提高ECMF的SOD、CAT酶活性,但降低POD酶活性(P<0.05)。難溶性Fe-P、Al-P處理下的菌絲體SOD、POD、CAT酶活性均高于Na-P,說(shuō)明難溶性磷處理有利于抗氧化酶升高;鋁脅迫使Ld2
7、的SOD、CAT酶活性增幅均大于Ld3和Pt715,POD酶活性降幅均小于Ld3和Pt715,推測(cè)Ld2的抗鋁脅迫能力較強(qiáng)。
?。?)相關(guān)性分析表明,3種ECMF的總P、Al、Al-P含量呈兩兩極顯著正相關(guān)(P<0.01),說(shuō)明P與Al的吸收有協(xié)同促進(jìn)作用,Al-P隨總P和Al含量的增多而增多,推測(cè)Al和P在進(jìn)入菌絲體內(nèi)仍可能相互結(jié)合。SOD與CAT酶活性呈極顯著正相關(guān),說(shuō)明SOD與CAT協(xié)同促進(jìn)消除抗氧自由基。SOD、CAT酶
8、活性與P、Al-P含量呈顯著正相關(guān)(P<0.05),說(shuō)明菌株通過(guò)提高SOD、CAT酶活性,抗鋁脅迫和活化難溶性磷能力增強(qiáng)。
?。?)3種菌株的CEC大小依次為L(zhǎng)d3≥Ld2>Pt715,推測(cè)Ld3和Ld2對(duì)Al3+的吸附量大于Pt715??偟膩?lái)看,Ld3、Ld2吸收鋁的Km大、Imax大,表明松乳菇更能適應(yīng)高濃度鋁的土壤環(huán)境。
?。?)鋁脅迫下,除Ld2的Cmin無(wú)明顯變化外,ECMF吸收磷的Km和Cmin值均減小,Im
9、ax值均增大,即鋁增強(qiáng)了菌株吸收磷的能力,并且供試菌株均能夠適應(yīng)低磷的土壤環(huán)境。松乳菇的兩個(gè)株系Ld2和Ld3吸收磷的Km和Imax均小于Pt715,說(shuō)明松乳菇更能適合低磷的土壤環(huán)境。
綜上,試驗(yàn)所用的3種菌株在酸鋁脅迫下均能適應(yīng)高鋁低磷環(huán)境,活化利用難溶性磷,且Ld2和Ld3的適應(yīng)能力和活化利用能力均強(qiáng)于Pt715。其中,Ld2生長(zhǎng)速度最快、抗鋁性最強(qiáng),Ld3吸收磷的能力最強(qiáng)。3種菌主要通過(guò)分泌H+或有機(jī)酸、促進(jìn)Al-P、F
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