降鈣素基因相關(guān)肽在尋常型銀屑病患者中的表達(dá)及其意義研究.pdf

1、目的:檢測降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)在尋常型銀屑病患者皮損及血漿中的表達(dá)水平了解CGRP與銀屑病的關(guān)系。檢測花生四烯酸乙醇胺(AEA)和神經(jīng)生長因子(NGF)在尋常型銀屑病患者血漿中的表達(dá)水平,并用CGRP處理尋常型銀屑病患者外周血T淋巴細(xì)胞,觀察其對T淋巴細(xì)胞黏附和遷移能力及IL-6、IFN-γ表達(dá)的影響,初步探討CGRP在尋常型銀屑病發(fā)病過程中的作用機(jī)制及其意義。
　　 方法:
　　 1.免疫組織化學(xué)方法檢測尋常型

2、銀屑病皮損及正常人皮膚組織中CGRP的蛋白表達(dá)情況,采用Motic Med6.O數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)中免疫組化自動分析程序檢測各組樣本陽性細(xì)胞的CGRP陽性目標(biāo)積分光密度值來反映CGRP蛋白的相對表達(dá)量。
　　 2.放射免疫測定法檢測尋常型銀屑病患者及正常人血漿中CGRP的表達(dá)水平,同時記錄尋常型銀屑病患者的皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)(PASI),分析其與外周血中CGRP蛋白表達(dá)水平的相關(guān)性。
　　 3.ELISA法檢測尋常

3、型銀屑病患者血漿中NGF的表達(dá)水平。
　　 4.液質(zhì)聯(lián)用法檢測尋常型銀屑病患者血漿中AEA的濃度。
　　 5.密度梯度離心法和CD3+磁珠分離尋常型銀屑病患者外周血T淋巴細(xì)胞并培養(yǎng),采用不同濃度CGRP處理T淋巴細(xì)胞,觀察其黏附與遷移能力的改變,同時用ELISA法檢測各處理組細(xì)胞上清液中IL-6、IFN-γ的蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:
　　 1.尋常型銀屑病患者組和健康對照組CGRP的免疫組化陽性表達(dá)積

4、分光密度值分別為212.9±23.8和144.6±17.6,患者組皮損CGRP蛋白表達(dá)水平顯著高于健康對照組。
　　 2.尋常型銀屑病患者組和健康對照組的血漿CGRP水平分別為49.43±4.59pg/mL和34.97±4.41pg/mL,患者組血漿CGRP蛋白表達(dá)水平顯著高于健康對照組;患者血漿中CGRP表達(dá)水平與PASI評分呈正相關(guān)。
　　 3.尋常型銀屑病患者組和健康對照組血漿AEA水平分別O.15±0.01ng/

5、mL和O.11±0.01ng/mL,尋常型銀屑病患者組的血漿AEA表達(dá)水平顯著高于健康對照組。尋常型銀屑病患者組的血漿NGF表達(dá)水平與健康對照組無明顯差異。
　　 4.CGRP呈濃度依賴性促進(jìn)尋常型銀屑病外周血T淋巴細(xì)胞遷移及對基質(zhì)黏附的能力,并促進(jìn)T淋巴細(xì)胞分泌IL-6,但不影響IFN-γ的水平。
　　 結(jié)論:CGRP在尋常型銀屑病患者整體與局部蛋白表達(dá)水平均高于正常健康人,其血漿含量與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān),它可能是銀