生防真菌對(duì)葉螨類(lèi)植物害螨的微生物防治研究.pdf

1、本研究率先從建立生防真菌殺螨毒力的定量評(píng)價(jià)技術(shù)體系入手，以有代表性的朱砂葉螨為靶標(biāo)，篩選獲得了對(duì)螨卵和成螨高毒力的菌種(株)；測(cè)定了高效殺螨菌株球孢白僵菌Bb2860的分生孢子與10種常用化學(xué)殺螨劑的生物學(xué)相容性，并評(píng)價(jià)了該菌株與生物相容性良好的噠螨靈低劑量互作的協(xié)同殺螨卵作用；研究了該菌株孢子懸乳劑的殺螨卵作用以及不同溫濕度組合條件對(duì)其殺螨卵作用的影響。在此基礎(chǔ)上，用高效殺螨菌株的孢子懸乳劑小試產(chǎn)品在浙江柑桔園和新疆棉田分別進(jìn)行了柑桔

2、全爪螨和棉葉螨的田間防治試驗(yàn)。主要內(nèi)容和結(jié)果分述如下： 生防真菌對(duì)螨卵的毒力測(cè)定研究建立了生防真菌對(duì)螨卵毒力的定量評(píng)價(jià)技術(shù)體系，比較測(cè)定了球孢白僵菌、玫煙色擬青霉和金龜子綠僵菌的10個(gè)菌株對(duì)螨卵的毒力。結(jié)果表明，初感染的卵肉眼很難辯識(shí)，體視鏡下可見(jiàn)卵表面出現(xiàn)輕微皺縮，但此時(shí)很難將此直接歸因于真菌感染;三種生防真菌均存在對(duì)螨卵有侵染力的菌株，但不同菌種或菌株的毒力差異很大。由此建立起來(lái)生防真菌殺螨卵的定量評(píng)價(jià)技術(shù)體系。 生

3、防真菌對(duì)成螨的毒力測(cè)定經(jīng)過(guò)三年探索，研究建立了既保證生防真菌侵入又不影響成螨正?；顒?dòng)的毒力測(cè)定體系，并成功測(cè)定了2株球孢白僵菌、2株玫煙色擬青霉和6株金龜子綠僵菌對(duì)雌成螨的毒力。結(jié)果表明，白僵菌Bb2860和Bb734接種后各時(shí)段的LC<,50>和各劑量下的LT<,50>均很小，表現(xiàn)殺螨快、毒力強(qiáng)的特點(diǎn),通過(guò)各菌株對(duì)成螨LC<,50>和LT<,50>值的比較，Bb2860、Bb734、.Ma456和Ma727等4株生防真菌顯然屬于高效殺

4、螨菌株。溫濕度對(duì)白僵菌孢子懸乳劑殺螨卵活性的影響溫度和濕度是影響生防真菌孢子萌發(fā)和侵入的重要環(huán)境因子。首先，采用平板法測(cè)定了劑型化的白僵菌分生孢子(Bb2860孢子懸乳劑)在20、25和30℃與51％、74％和95％RH的9種溫濕組合條件下的萌發(fā)率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)24 h時(shí)后，各溫濕處理中的孢子萌發(fā)率均達(dá)到95％以上，但各處理前12 h的萌發(fā)率之間存在顯著差異。隨后，采用前述螨卵生測(cè)方法測(cè)定了該孢子懸乳劑在相同溫濕組合條件下對(duì)螨卵的毒力

5、，各組合處理中的低、中、高噴霧接種劑量分別為18、160和693個(gè)孢子/mm<'2>。結(jié)果顯示，各溫濕組合處理的螨卵孵化率隨接種后時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，但總是隨孢子劑量的增大而下降，第9～10天后對(duì)照組再無(wú)孵化。各溫濕組合條件下的孵化率觀察值較好地?cái)M合邏輯斯蒂模型(r<'2>=0.88)，其中溫度、濕度、溫濕互作以及溫度與劑量的互作被識(shí)別為顯著螨卵孵化速率的因子。根據(jù)各組合處理中孵化和未孵化卵數(shù)計(jì)算獲得低、中、高劑量下的螨卵死亡率分別為15

6、.0～40.4％、48.9～66,6％和62.9～87.5％，而對(duì)照組的自然死亡率僅5.6～11.3％。機(jī)值分析結(jié)果表明，孢子懸乳劑在9種溫濕度組合條件下的LC<,50>為65～320個(gè)孢子/mm<'2>，而在25、30℃與74％和95％RH的4個(gè)組合中的LCso僅65～78個(gè)孢子/mm<'2>。這說(shuō)明懸乳劑不僅能夠適應(yīng)常態(tài)變化的田間環(huán)境，而且比未劑型化孢子的殺卵活性顯著增強(qiáng)。 白僵菌與常用化學(xué)殺螨劑的相容性及其協(xié)同殺螨卵效應(yīng)篩

7、選生物學(xué)相容的化學(xué)殺螨劑與生防真菌制劑混配混用，使藥劑速效性與菌劑持效性相結(jié)合，是生產(chǎn)上減藥增效策略的技術(shù)保障。通過(guò)測(cè)定10種常用化學(xué)殺螨劑在不同濃度下對(duì)白僵菌Bb2860分生孢子萌發(fā)率的影響，發(fā)現(xiàn)噠螨靈、克螨特和尼索朗的生物相容性甚佳，即使田間常規(guī)用藥濃度也不顯著影響孢子萌發(fā)率；常用濃度的5倍稀釋液，樂(lè)斯本和噠螨靈的相容性達(dá)到相同水平，而有些參試藥劑即使常用濃度的10倍稀釋液也顯著影響萌發(fā)率，如瀏陽(yáng)霉素、三唑錫、苦參堿等。在菌藥互作殺

8、螨卵的生物測(cè)定中，供試菌株的未劑型化分生孢子對(duì)螨卵的LC<,50>為546(406～818)個(gè)孢子/mm<'2>，孢子水懸液中按田間常規(guī)用量的0.1％、2.0％和5.0％添加噠螨靈，LC<,50>分別降至322(220～527)、199(144～282)和75(48～103)個(gè)孢子/mm<'2>，與未劑型化孢子相比，殺卵效價(jià)提高1.7～7.3倍。白僵菌孢子懸乳劑與低劑量噠螨靈混用對(duì)柑桔全爪螨的田間防效柑桔全爪螨(Panonychus c

9、itri)俗稱(chēng)柑桔紅蜘蛛，是柑桔主要害蟲(chóng)之一，抗藥性問(wèn)題十分突出。在前期研究工作基礎(chǔ)之上，將高效殺螨菌株球孢白僵菌Bb2860的孢子懸乳劑(含孢量為1×10<'10>和2×10<'10>個(gè)孢子/mL)于2005年秋在浙江黃巖3個(gè)坡地梯形柑桔園(試驗(yàn)1～3)進(jìn)行了與低劑量噠螨靈菌藥混用的田間藥效試驗(yàn)，考查純菌劑、純藥劑及菌藥混用各處理對(duì)全爪螨的田間防效。試驗(yàn)1和2均包括7個(gè)處理，即4個(gè)用菌處理、1個(gè)純用藥對(duì)照(藥液含噠螨靈AI3.75μg

10、/mL)、1個(gè)純?nèi)橛蛯?duì)照和1個(gè)清水對(duì)照。4個(gè)菌劑處理分別為2個(gè)純菌處理和2個(gè)菌藥混用處理。每處理小區(qū)重復(fù)3次，每小區(qū)為約40米長(zhǎng)的桔垅，約25～30棵桔樹(shù)，各處理小區(qū)隨機(jī)區(qū)組分布。各菌劑用水稀釋100倍，采用背負(fù)式機(jī)動(dòng)彌霧器以1.6馬力5000轉(zhuǎn)的額定功率、按150 L/ha的用液量進(jìn)行機(jī)動(dòng)彌霧，按15天間隔用菌2次。試驗(yàn)3在試驗(yàn)1和2的基礎(chǔ)上增添了噠螨靈常規(guī)用量(11.25 g/ha,即藥液含噠螨靈AI 75μg/mL)作為標(biāo)準(zhǔn)用藥對(duì)

11、照，同時(shí)菌劑噴霧濃度降至8×10<'6>和8×10<'7>個(gè)孢子/mL。試驗(yàn)中菌藥混用處理中噠螨靈用量為.562.5AI mg/ha，相當(dāng)于標(biāo)簽推薦用量的3.75～6.25％。試驗(yàn)1～3的初始螨密度分別為17.8、15.0和12.0頭/葉。與清水對(duì)照相比，試驗(yàn)1和2中1.5～3.0×10<'13>個(gè)孢子/ha的用菌量與低劑量噠螨靈混用2次能將秋螨種群控制在很低水平達(dá)35天，相對(duì)防效和螨密度減退率總平均分別達(dá)到83.2～92.3％和73.

12、8～91.2％。試驗(yàn)3中噠螨靈常規(guī)用藥量對(duì)害螨作用快卻不持久，藥效僅維持5天左右；比試驗(yàn)1和2降低的用菌量也有顯著防效，尤其菌藥混用的控螨效果相當(dāng)理想。三次田間試驗(yàn)的結(jié)果表明，在柑桔害螨防治中，采用≤1.5×10<'13>個(gè)孢子/ha的用菌量與低劑量殺螨劑混用，足以及時(shí)有效地壓低螨群密度，而且持效期長(zhǎng)。菌藥混用時(shí)，用菌量不必過(guò)高，有利于控制生防菌劑成本。這是國(guó)內(nèi)外目前用球孢白僵菌防治柑桔全爪螨的首例成功田間試驗(yàn)。 五種孢子懸乳劑

13、對(duì)新疆棉葉螨的田間防效比較新疆是我國(guó)棉花主產(chǎn)區(qū)，品質(zhì)好產(chǎn)量高，但常年遭受2～3種棉葉螨的嚴(yán)重危害。由于新疆棉區(qū)地理生態(tài)條件特殊，殺螨菌劑的設(shè)計(jì)不僅要考慮室內(nèi)測(cè)定的毒力，還要考慮菌株的抗逆力。因此，選用球孢白僵菌Bb2860、Bb734和金龜子綠僵菌Ma456、：Ma727及Ma2080等殺螨毒力高或生態(tài)適應(yīng)性較強(qiáng)的5株生防真菌，用其孢子粉配制成含粉10％(w/v)的孢子懸乳劑，在新疆阿拉爾市的塔克拉瑪干沙漠北緣中段棉區(qū)的兩塊棉田進(jìn)行了棉

14、葉螨的田間藥效試驗(yàn)。試驗(yàn)1包括7個(gè)處理，即5個(gè)菌劑處理、1個(gè)清水對(duì)照和一個(gè)純?nèi)橛蛯?duì)照。試驗(yàn)2剔除了試驗(yàn)1中表現(xiàn)差的Ma2080用菌處理，包括4個(gè)純用菌處理、4個(gè)菌劑與低劑量樂(lè)斯本的混用處理，在試驗(yàn)1的兩個(gè)對(duì)照之上增設(shè)純用藥對(duì)照(樂(lè)斯本用量為AI 7.2 g/ha，相當(dāng)于田間常規(guī)用量的10％)。試驗(yàn)均采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每處理3次小區(qū)重復(fù)，每小區(qū)48 m<'2>。試驗(yàn)1間隔15天噴菌2次，試驗(yàn)2因受罕見(jiàn)高溫影響僅噴菌1次，噴霧方法同上。結(jié)果

15、顯示，生防真菌孢子懸乳劑單用或與低劑量樂(lè)斯本混用，對(duì)棉葉螨具有顯著的控制效果。其中，尤以綠僵菌Ma456與低劑量樂(lè)斯本混用的控螨效果最佳，低容量(150 L/ha)機(jī)動(dòng)噴霧后第5日的螨密度減退率和相對(duì)防效達(dá)到92.4％和95.4％，第10日為93.9％和96.4％；白僵菌.Bb734與低劑量樂(lè)斯本混用的控螨效果也相當(dāng)理想，田間噴霧后第5日的螨密度減退率和相對(duì)防效為81.0％和89.1％，第10日為83.9％和91.1％。兩次田間試驗(yàn)證實(shí)

16、了生防菌劑對(duì)棉葉螨的顯著防效，但試驗(yàn)2受高溫影響較大，菌藥混用的協(xié)同增效作用的顯著性還有待進(jìn)一步的試驗(yàn)證明。綜上所述，本研究的主要成果和創(chuàng)新點(diǎn)在于：一是研究建立了生防真菌殺螨效果的評(píng)價(jià)技術(shù)體系，篩選獲得了一批高效殺螨菌株。二是揭示了高效殺螨菌株的孢子懸乳劑能顯著降低對(duì)環(huán)境濕度的依賴(lài)性，其殺螨效果顯著優(yōu)于未劑型化的孢子；篩選獲得了與球孢白僵菌等生防真菌生物學(xué)相容的高效低毒化學(xué)殺螨劑，揭示了菌一藥混用殺螨的互作效應(yīng)。三是成功創(chuàng)制了以高效殺螨