大黃及一清軟膠囊指紋圖譜研究與應(yīng)用.pdf

1、中藥是多組分復(fù)雜體系,化學(xué)成分眾多,通過化學(xué)對照品對成分進行一一鑒別有較大難度,所以將中藥全部成分峰看成一個整體,將其內(nèi)在特征翻譯成藥品的特征指紋,稱為中藥指紋圖譜技術(shù)。由于中藥指紋圖譜所反映的體系非常復(fù)雜,獲得的信息數(shù)據(jù)量大,需要對數(shù)據(jù)進行處理分析,目前常用的方法主要有直觀比對法、量化數(shù)據(jù)比對法、聚類分析法、主成分分析法和人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析法等。曲線匹配法在國際上有廣泛的應(yīng)用,如生長曲線的研究、老年人步態(tài)研究、荷爾蒙的時間序列研究、基因

2、表達、圖像識別等,但在中藥指紋圖譜上的應(yīng)用仍為空白。
　　本論文由三個部分組成,包括中藥指紋圖譜研究進展、曲線匹配方法應(yīng)用于大黃單味藥材、復(fù)方以及復(fù)方血清指紋圖譜的研究和復(fù)方有效成分含量測定。
　　第一部分，綜述了中藥指紋圖譜常用研究方法與技術(shù)、中藥指紋圖譜評價方法、相似度評價方法和指紋圖譜評價方法的應(yīng)用等四個方面的內(nèi)容。
　　第二部分，以大黃、含大黃復(fù)方一清軟膠囊及一清軟膠囊血清為例,研究曲線匹配方法在指紋圖譜數(shù)據(jù)處

3、理上的應(yīng)用。
　　首先,建立了三個品種大黃對照藥材及不同產(chǎn)地14個市售大黃飲片的UPLC指紋圖譜,研究曲線匹配方法對色譜峰進行選擇、對齊和比較的方法,同時發(fā)現(xiàn)了不同產(chǎn)地大黃藥材共有成分8個,通過對照品對照及LC-MS法鑒定,分別為3-O-單沒食子?；咸烟擒?、4-O-單沒食子酰基葡萄糖苷、沒食子酸、大黃素甲醚葡萄糖苷、蘆薈大黃素、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚。為研究不同產(chǎn)地中藥的共有成分提供思路。比較了相似度分析、聚類分析和主成分分

4、析等方法的應(yīng)用,結(jié)果顯示,不同基源、不同產(chǎn)地大黃相似度不高,說明相似度分析有其局限性;聚類分析與相似度分析結(jié)果基本一致,說明這兩種方法不能判斷大黃質(zhì)量,也不能區(qū)別市售大黃樣品的品種;主成分分析指出了19個共有成分中4個較為重要的成分,通過對比這4個成分的含量,結(jié)合聚類分析結(jié)果和各個樣品的整體圖譜,可以判斷出質(zhì)量較優(yōu)的樣品。
　　為了進一步研究曲線匹配方法在中藥復(fù)方指紋圖譜中的應(yīng)用,測定了5個廠家共15個批號的一清軟膠囊指紋圖譜,采

5、用曲線匹配法分析,得到14個共有成分,通過對照品對照鑒定了其中4個成分,分別為鹽酸小蘗堿、黃芩苷、大黃酸和大黃素。比較了相似度分析、聚類分析和主成分分析等方法應(yīng)用于一清軟膠囊的質(zhì)量評價,聚類分析與相似度分析結(jié)果基本一致,可以很好地區(qū)別不同廠家一清軟膠囊樣品,主成分分析指出了7個較為重要的成分,其中有四個成分也為曲線匹配分析的共有成分。通過對照品及單味藥材的對比,歸屬其中的特征色譜峰。
　　最后,研究一清軟膠囊的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),分別用

6、兩個廠家一清軟膠囊大鼠給藥,檢測到其血清移行成分分別為18個、23個,其中大黃素為原型入血成分。
　　第三部分,建立了HPLC法同時測定一清軟膠囊中8種代表性成分的含量,結(jié)果表明大黃素和黃芩素的含量較高,8種指標成分在不同批次樣品間含量穩(wěn)定。采用多指標成分綜合評價的正交試驗,優(yōu)化了樣品制備方法。
　　本論文的創(chuàng)新點:中藥指紋圖譜常用的相似度分析方法的第一步仍需人為選峰,有較大的主觀性。曲線匹配法在中藥指紋圖譜上的應(yīng)用目前仍為