大黃及一清軟膠囊指紋圖譜研究與應(yīng)用.pdf

1、中藥是多組分復(fù)雜體系,化學(xué)成分眾多,通過(guò)化學(xué)對(duì)照品對(duì)成分進(jìn)行一一鑒別有較大難度,所以將中藥全部成分峰看成一個(gè)整體,將其內(nèi)在特征翻譯成藥品的特征指紋,稱為中藥指紋圖譜技術(shù)。由于中藥指紋圖譜所反映的體系非常復(fù)雜,獲得的信息數(shù)據(jù)量大,需要對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析,目前常用的方法主要有直觀比對(duì)法、量化數(shù)據(jù)比對(duì)法、聚類(lèi)分析法、主成分分析法和人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析法等。曲線匹配法在國(guó)際上有廣泛的應(yīng)用,如生長(zhǎng)曲線的研究、老年人步態(tài)研究、荷爾蒙的時(shí)間序列研究、基因

2、表達(dá)、圖像識(shí)別等,但在中藥指紋圖譜上的應(yīng)用仍為空白。
　　本論文由三個(gè)部分組成,包括中藥指紋圖譜研究進(jìn)展、曲線匹配方法應(yīng)用于大黃單味藥材、復(fù)方以及復(fù)方血清指紋圖譜的研究和復(fù)方有效成分含量測(cè)定。
　　第一部分，綜述了中藥指紋圖譜常用研究方法與技術(shù)、中藥指紋圖譜評(píng)價(jià)方法、相似度評(píng)價(jià)方法和指紋圖譜評(píng)價(jià)方法的應(yīng)用等四個(gè)方面的內(nèi)容。
　　第二部分，以大黃、含大黃復(fù)方一清軟膠囊及一清軟膠囊血清為例,研究曲線匹配方法在指紋圖譜數(shù)據(jù)處

3、理上的應(yīng)用。
　　首先,建立了三個(gè)品種大黃對(duì)照藥材及不同產(chǎn)地14個(gè)市售大黃飲片的UPLC指紋圖譜,研究曲線匹配方法對(duì)色譜峰進(jìn)行選擇、對(duì)齊和比較的方法,同時(shí)發(fā)現(xiàn)了不同產(chǎn)地大黃藥材共有成分8個(gè),通過(guò)對(duì)照品對(duì)照及LC-MS法鑒定,分別為3-O-單沒(méi)食子酰基葡萄糖苷、4-O-單沒(méi)食子?；咸烟擒?、沒(méi)食子酸、大黃素甲醚葡萄糖苷、蘆薈大黃素、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚。為研究不同產(chǎn)地中藥的共有成分提供思路。比較了相似度分析、聚類(lèi)分析和主成分分

4、析等方法的應(yīng)用,結(jié)果顯示,不同基源、不同產(chǎn)地大黃相似度不高,說(shuō)明相似度分析有其局限性;聚類(lèi)分析與相似度分析結(jié)果基本一致,說(shuō)明這兩種方法不能判斷大黃質(zhì)量,也不能區(qū)別市售大黃樣品的品種;主成分分析指出了19個(gè)共有成分中4個(gè)較為重要的成分,通過(guò)對(duì)比這4個(gè)成分的含量,結(jié)合聚類(lèi)分析結(jié)果和各個(gè)樣品的整體圖譜,可以判斷出質(zhì)量較優(yōu)的樣品。
　　為了進(jìn)一步研究曲線匹配方法在中藥復(fù)方指紋圖譜中的應(yīng)用,測(cè)定了5個(gè)廠家共15個(gè)批號(hào)的一清軟膠囊指紋圖譜,采

5、用曲線匹配法分析,得到14個(gè)共有成分,通過(guò)對(duì)照品對(duì)照鑒定了其中4個(gè)成分,分別為鹽酸小蘗堿、黃芩苷、大黃酸和大黃素。比較了相似度分析、聚類(lèi)分析和主成分分析等方法應(yīng)用于一清軟膠囊的質(zhì)量評(píng)價(jià),聚類(lèi)分析與相似度分析結(jié)果基本一致,可以很好地區(qū)別不同廠家一清軟膠囊樣品,主成分分析指出了7個(gè)較為重要的成分,其中有四個(gè)成分也為曲線匹配分析的共有成分。通過(guò)對(duì)照品及單味藥材的對(duì)比,歸屬其中的特征色譜峰。
　　最后,研究一清軟膠囊的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),分別用

6、兩個(gè)廠家一清軟膠囊大鼠給藥,檢測(cè)到其血清移行成分分別為18個(gè)、23個(gè),其中大黃素為原型入血成分。
　　第三部分,建立了HPLC法同時(shí)測(cè)定一清軟膠囊中8種代表性成分的含量,結(jié)果表明大黃素和黃芩素的含量較高,8種指標(biāo)成分在不同批次樣品間含量穩(wěn)定。采用多指標(biāo)成分綜合評(píng)價(jià)的正交試驗(yàn),優(yōu)化了樣品制備方法。
　　本論文的創(chuàng)新點(diǎn):中藥指紋圖譜常用的相似度分析方法的第一步仍需人為選峰,有較大的主觀性。曲線匹配法在中藥指紋圖譜上的應(yīng)用目前仍為