長(zhǎng)期高蛋白包含對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠肝臟.pdf

1、研究背景：
　　 2型糖尿病是遺傳和環(huán)境因素長(zhǎng)期共同作用的結(jié)果，胰島素抵抗和胰島素分泌不足是其重要的兩個(gè)發(fā)病機(jī)制，而胰島素抵抗通常被認(rèn)為是始動(dòng)因素。肥胖可影響胰島素信號(hào)傳導(dǎo)途徑的多個(gè)環(huán)節(jié)，降低胰島素效應(yīng)和敏感性，導(dǎo)致血糖調(diào)節(jié)異常。長(zhǎng)期高脂飲食可導(dǎo)致肥胖、胰島素抵抗，成為2型糖尿病的高危人群。而長(zhǎng)期高蛋白飲食是否會(huì)引起肥胖和糖尿病尚無(wú)定論。目前多數(shù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究顯示：長(zhǎng)期高蛋白飲食可減輕體重，改善血糖控制，是一種有效的高血糖

2、飲食干預(yù)措施。但近年來(lái)的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，人們飲食蛋白增加的同時(shí)2型糖尿病發(fā)病率亦迅速增高，從而對(duì)長(zhǎng)期高蛋白飲食攝入利于血糖控制這一觀念提出了挑戰(zhàn)。
　　 另外，飲食蛋白對(duì)機(jī)體糖代謝及胰島素敏感性的影響十分復(fù)雜，它可能與研究對(duì)象的遺傳特征、營(yíng)養(yǎng)狀況、攝入蛋白質(zhì)的種類、形式以及攝入時(shí)間等多種因素有關(guān)。目前研究多限于正常和糖尿病個(gè)體，而對(duì)肥胖個(gè)體胰島素敏感性的長(zhǎng)期系統(tǒng)研究較少，對(duì)長(zhǎng)期高蛋白飲食影響胰島素抵抗機(jī)制方面的研究更是鳳毛

3、麟角。
　　 肝臟是重要能量代謝器官，是胰島素作用的主要靶器官，在全身糖代謝調(diào)節(jié)中具有相當(dāng)重要的作用。研究證明，肝臟胰島素抵抗在肥胖和/或營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩導(dǎo)致的2型糖尿病中起重要作用。在肥胖和2型糖尿病患者中，靶組織的胰島素敏感性降低、胰島素受體底物(IRSs)含量減少，PI3K活性下調(diào)，IRS/PI3K通路作用減弱，胰島素調(diào)節(jié)糖、脂代謝的信號(hào)減弱，導(dǎo)致代謝紊亂。IRS2分布廣泛，主要在肝臟和胰島β細(xì)胞表達(dá)，在促進(jìn)肝臟糖原合成和抑制肝糖

4、輸出方面，以IRS2為主。葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子2(GLUT2)主要分布在肝臟、腎臟、小腸和胰島β細(xì)胞，其中肝臟組織中以GLUT2為主，占肝細(xì)胞葡萄糖載體蛋白的97％以上，GLUT2主要負(fù)責(zé)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)。
　　 為此，我們選擇肝組織IRS2和GLUT2作為研究對(duì)象，探討長(zhǎng)期高蛋白飲食對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠胰島素敏感性的影響機(jī)制。
　　 目的：
　　 本研究課題通過(guò)觀察長(zhǎng)期高蛋白飲食對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠肝臟IRS2及GLUT2分子表達(dá)

5、的影響，探討高蛋白飲食對(duì)胰島素敏感性影響機(jī)制。
　　 方法：
　　 取經(jīng)24周等熱量高蛋白飼料組(HPn=12蛋白熱量占比36.7％)、高脂飼料組(HFn=11脂肪熱量占比38.3％)和普通飼料組(NCn=11)飼養(yǎng)后的營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠肝組織；分別采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse transcription-PCR;RT-PCR)、蛋白免疫印跡(Western Blot;WB)法檢測(cè)在mRNA和蛋白水平上肝組織GLU

6、T2、IRS2的表達(dá)，以普通飼料組作為正常對(duì)照，以高脂飼料組作為陽(yáng)性對(duì)照，以觀察長(zhǎng)期高蛋白飲食對(duì)GLUT2、IRS2分子表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1肝臟IRS2 mRNA的表達(dá)：以肝臟IRS2與內(nèi)參照的灰度比值表示，HP組IRS2 mRNA(0.99±0.07)與NC組(0.83±0.07)和HF組(0.65±0.09)比較，分別提高了16％(P＜0.05)和52％(P＜0.01)。
　　 2肝臟IRS2

7、蛋白的表達(dá)：以肝臟IRS2與內(nèi)參照的灰度比值表示，HP組(1.18±0.049)IRS2蛋白與NC組(0.95±0.08)和HF組(0.68±0.045)比較，分別提高了24％（P＜0.05）和74％(P＜0.01)。
　　 3肝臟GLUT2 mRNA的表達(dá)：以肝臟GLUT2與內(nèi)參照的灰度比值表示，HP組(0.63±0.059)與NC組(0.51±0.058)和HF組(0.14±0.007)比較，分別提高了24％(P＜0.05)

8、和71％（P＜0.01）。
　　 4肝臟GLUT2蛋白的表達(dá)：以肝臟GLUT2與內(nèi)參照的灰度比值表示，HP組(0.84±0.05)與NC組(0.67±0.05)和HF組(0.49±0.04)比較，分別提高了25％(P＜0.05)和352％(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 與普通飲食相比較，長(zhǎng)期等熱量高蛋白飲食顯著上調(diào)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠肝臟IRS2、GLUT2mRNA和蛋白水平上的表達(dá)，對(duì)肥胖大鼠肝臟胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)