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1、目的:建立營(yíng)養(yǎng)性肥胖小鼠模型,篩選營(yíng)養(yǎng)性肥胖小鼠與正常小鼠在不同時(shí)間段脂肪組織特異蛋白。
方法:50只C57BL/6J鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機(jī)分為高脂組與低脂組,分別以高脂飼料(58 kcal% fat)及其對(duì)照低脂飼料(11 kcal% fat)喂養(yǎng)14周。分別于0周,4周,14周取血、附睪脂肪組織,4周、11周、13周行IPGTT。采用蛋白雙向凝膠電泳技術(shù)分離4周、14周高脂組與低脂組脂肪組織總蛋白,PD-Quest
2、軟件分析電泳結(jié)果,選擇有顯著差異的蛋白點(diǎn)做串聯(lián)介質(zhì)輔助的激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-TOF)分析。
結(jié)果:高脂組與低脂組體重在1周末即產(chǎn)生顯著差異(p<0.05)。4周時(shí)IPGTT0分,15分,30分,60分血糖差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05),高脂組與低脂組120分血糖差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);高脂組與低脂組TG、TG、HDL-C、LDL-C、尿酸差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);空腹靜脈血糖、胰島
3、素差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。11周時(shí)IPGTT120分血糖差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);0分,15分,30分,60分高脂組與低脂組血糖差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。13周時(shí)IPGTT15分,30分,120分高脂組與低脂組血糖差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);0分,60分高脂組與低脂組血糖差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。14周時(shí)高脂組與低脂組TC、TG、HDL-C、LDL-C、尿酸、空腹靜脈血糖差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.
4、05);胰島素差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。二維電泳提示:14周高脂組與低脂組差異1.5倍以上的無(wú),差異在1.2-1.5倍之間的有18個(gè)點(diǎn),下調(diào)17個(gè)點(diǎn),上調(diào)1個(gè)點(diǎn)。4周高脂組與低脂組差異1.5倍以上的10個(gè)點(diǎn),上調(diào)1個(gè),下調(diào)9個(gè);差異在1.2-1.5倍之間的有26個(gè)點(diǎn),下調(diào)25個(gè),上調(diào)1個(gè)。我們選擇有顯著性差異的42個(gè)點(diǎn)用于質(zhì)譜分析。MALDI-TOF-TOF分析結(jié)果得到了16個(gè)可信蛋白。
結(jié)論:生化等結(jié)果提示:所建
5、立的營(yíng)養(yǎng)性肥胖小鼠模型成功,此模型具有肥胖及代謝綜合征表現(xiàn)。4周定位肥胖早期,僅存在血脂、糖耐量及尿酸的異常,無(wú)空腹血糖異常及胰島素抵抗。該模型僅施以單純的飲食因素,制作過(guò)程簡(jiǎn)單可重復(fù)性高,制作周期短(僅13周),與人類(lèi)肥胖癥的發(fā)病過(guò)程發(fā)病機(jī)制相似,極好的模擬了肥胖早期及終末期的各個(gè)變化過(guò)程,是良好的動(dòng)物模型,并為后續(xù)的研究打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。通過(guò)二維電泳及MALDI-TOF-TOF鑒定出差異蛋白可能為肥胖早期特異蛋白標(biāo)記物及肥胖的保護(hù)因子
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