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文檔簡介
1、目的:探討Caveolin-1對血管吻合術(shù)后TNF-α、IL-6和IL-10表達的影響。
方法:本實驗對家兔頸總動脈離斷后行端端吻合手術(shù),建立血管吻合的動物模型。40只成年家兔取自南華大學實驗動物部,隨機分為4組:正常組、手術(shù)組、空轉(zhuǎn)染組、Caveolin-1轉(zhuǎn)染組。分別于術(shù)后7d、14d處死家兔,取術(shù)后7d標本用于實時熒光定量PCR和Western Blot檢測,14d的標本用于HE染色及免疫組化。采用蘇木精-伊紅染色,觀察
2、吻合口血管動脈內(nèi)膜變化情況;分別應用實時熒光定量 PCR、Western Blot和免疫組化檢測家兔吻合術(shù)后血管組織中Caveolin-1、TNF-α、IL-6、IL-10的表達水平。
結(jié)果:1、組織切片HE染色形態(tài)學觀察,手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組術(shù)后14d血管內(nèi)膜增生明顯,血管壁增厚;而轉(zhuǎn)染組血管內(nèi)膜僅有局部增生,血管壁增厚不如手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組明顯。2、實時熒光定量PCR顯示,Caveolin-1轉(zhuǎn)染組TNF-α、IL-6 mRNA
3、表達水平明顯低于手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組,但高于對照組(P<0.05)。Caveolin-1轉(zhuǎn)染組IL-10 mRNA表達水平明顯高于手術(shù)組、空轉(zhuǎn)染組和對照組(P<0.05)。與正常組比較,手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組中Caveolin-1 mRNA表達明顯降低(P<0.05),而轉(zhuǎn)染組Caveolin-1 mRNA表達明顯高于手術(shù)組(P<0.05)。3、Western Blot檢測顯示Caveolin-1在各組均有表達,與正常組比較,手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組中C
4、aveolin-1蛋白表達明顯降低(P<0.05),而轉(zhuǎn)染組 Caveolin-1蛋白表達明顯高于手術(shù)組(P<0.05)。與正常組比較,手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組中TNF-α、IL-6蛋白表達明顯增強(P<0.05),轉(zhuǎn)染組 TNF-α、IL-6蛋白表達較手術(shù)組明顯降低(P<0.05)。與正常組比較,手術(shù)組和空轉(zhuǎn)染組中 IL-10蛋白表達增強(P<0.05),轉(zhuǎn)染組 IL-10蛋白表達較手術(shù)組明顯增強(P<0.05)。4、免疫組化染色顯示轉(zhuǎn)染組T
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