黃芩等中藥的紫外指紋圖譜及黃芩苷活性研究.pdf

1、本文首先對(duì)黃芩(RadixScutellariae)等9種常用中草藥建立了紫外吸收指紋圖譜和提取物的定量測(cè)定方法,進(jìn)而研究了黃芩苷對(duì)大菱鲆常見(jiàn)致病菌的體外抑菌效果及其對(duì)大菱鲆固有免疫的影響。
　　 主要研究結(jié)果如下:
　　 1.黃芩（RadixScutellariae）飲片加純化水浸泡后加熱水提,所得到的水提液分別通過(guò)加入乙醇沉淀精制和殼聚糖凝絮精制。結(jié)果發(fā)現(xiàn),黃芩水提液、乙醇沉淀精制液以及殼聚糖凝絮精制液的紫外吸收?qǐng)D譜

2、類似,在273.60nm波長(zhǎng)處有較大吸收峰,在312.40nm處有較小吸收峰,而在224.30nm和308.12nm處有最小吸收。
　　 以最大吸收峰為固定波長(zhǎng),測(cè)定不同濃度梯度黃芩提取液的紫外吸收值,發(fā)現(xiàn)生藥濃度與紫外吸收值呈良好的線性關(guān)系,其回歸方程為y=4.2857x,R2=0.9986。
　　 上述結(jié)果表明,黃芩飲片經(jīng)水煮提取,以及經(jīng)過(guò)不同精制方法處理后,其紫外吸收?qǐng)D譜可以作為黃芩定性鑒別的依據(jù),而根據(jù)線性方程可

3、進(jìn)行黃芩提取物的定量檢測(cè)。
　　 對(duì)黨參(Radixcodonopsitis)、黃芪（RadixAstragali）、金銀花(FlosLonicerae)、蒲公英(HerbaTaraxaci)、忍冬藤(CaulisLonicerae)、大青葉(FoliumIsatidis)、甘草(RadixGlycyrrhizae)、貫葉連翹(FructusForsythiae)等8種中草藥飲片的研究也得到類似的結(jié)果,但不同種類的中藥,其紫外吸

4、收峰的位置以及回歸方程有差異。
　　 2.本文第二部分研究了黃芩苷對(duì)大菱鲆常見(jiàn)致病菌的體外抑菌效果,以及黃芩苷對(duì)大菱鲆固有免疫相關(guān)酶活性的影響。
　　 (1)黃芩苷對(duì)大菱鲆的常見(jiàn)致病菌:鰻弧菌(Vibrioanguillarum)、大菱鲆弧菌(Vibrioscophthalmi)、哈維氏弧菌(Vibrioharveyi)和愛(ài)德華氏菌(Edwardsiella)的體外抑菌試驗(yàn)使用了兩種方法:
　　 ①牛津杯法。將黃

5、芩苷配成從100到100000ppm梯度的藥液,測(cè)得黃芩苷對(duì)鰻弧菌、大菱鲆弧菌、哈維氏弧菌和愛(ài)德華氏菌的MIC分別為500ppm、1000ppm、500ppm和500ppm,抑菌圈大小分別為16.9±5.1mm、12.7±2.0mm、22.6±6.3mm和14.2±2.8mm。
　　 ②菌落計(jì)數(shù)法。0-500ppm黃芩苷有抑菌作用而非殺菌作用。黃芩苷500ppm時(shí),鰻弧菌、大菱鲆弧菌、哈維氏弧菌和愛(ài)德華氏菌的菌落數(shù)分別比對(duì)照組降

6、了79.77％,86.61％,55.34％,46.87％。即:黃芩苷對(duì)病原菌的抑菌能力:大菱鲆弧菌＜鰻弧菌＜愛(ài)德華氏菌＜哈維氏弧菌。
　　 (2)將黃芩苷按0％、0.75％、1.5％、3％的比例拌入餌料,投喂大菱鲆。于0d、5d、15d、20d、25d、30d、35d、40d時(shí)抽取尾靜脈血測(cè)定血清溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)和堿性磷酸酶(AKP)的活性,發(fā)現(xiàn):
　　 ①黃芩苷(0-3％

7、)對(duì)LZM活性存在劑量效應(yīng)。且LSZ活性隨時(shí)間先升高后降低,在30天有最大值,此時(shí)對(duì)照組LSZ活性為0.952±0.067ug/ml,黃芩苷組為1.203±0.054、1.305±0.043和1.507±0.062ug/ml。
　　 ②黃芩苷對(duì)SOD活性影響不明顯。前15天黃芩苷組SOD活性高于對(duì)照組,有劑量效應(yīng),SOD最高值為36.46U/ml（高濃度組）。但在25天后低于對(duì)照組,且SOD活性在各組間無(wú)明顯變化,認(rèn)為存在免疫疲