HSP90在難愈創(chuàng)面中的作用.pdf

1、隨著社會(huì)進(jìn)步，生活質(zhì)量提高，難愈創(chuàng)面作為糖尿病等各類疾病的常見并發(fā)癥，發(fā)生率越來越高，其高致殘率嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，成為了臨床治療面臨的一大嚴(yán)峻難題。但是各類難愈創(chuàng)面的影響因素極為復(fù)雜，所以探索難愈創(chuàng)面的上游靶點(diǎn)，尋找有效的治療方法極為迫切。
　　熱休克蛋白90（heatshockprotein90，HSP90）作為廣泛存在的分子伴侶，參與調(diào)控很多生長(zhǎng)因子的表達(dá)。而在缺氧狀態(tài)下，HSP90的高表達(dá)能夠有效促進(jìn)人表皮細(xì)胞的遷移。

2、為了將這一發(fā)現(xiàn)與臨床應(yīng)用相結(jié)合，我們把HSP90應(yīng)用于臨床常見的兩種難愈創(chuàng)面中，即糖尿病性難于創(chuàng)面及缺血性難愈創(chuàng)面。
　　本研究包含兩部分：
　　第一部分：HSP90在糖尿病性難于創(chuàng)面中的作用
　　方法：使用鏈脲佐菌素（Streptozocin，STZ）誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型，并在其背部做一全層皮膚缺損。并隨機(jī)分為四組：空白組（B組）、HSP90組（C組）、胰島素組（D組）及HSP90&胰島素混合用藥組（E組），每組20

3、只。并于創(chuàng)面涂抹藥物治療后第3天、第7天、第10天、第14天及第21天進(jìn)行大體觀察及活體取材做常規(guī)病理學(xué)觀察，采用免疫組化評(píng)定創(chuàng)面HSP90、胰島素樣因子（insulinlikefactor-1，IGF-1）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforminggrowthfactorβ1，TGF-β1）及基質(zhì)金屬蛋白酶9（matrixmetallopeptidase9，MMP-9）的表達(dá)水平，并分析其平均光密度值及積分光密度值，觀察其表達(dá)強(qiáng)度及

4、規(guī)律。結(jié)果：在我們的研究中發(fā)現(xiàn)，HSP90能夠有效改善創(chuàng)面的愈合速率，取得與胰島素相似的療效。并且，HSP90的表達(dá)與創(chuàng)面的愈合有著密切的關(guān)系。同時(shí)我們觀察到，HSP90表達(dá)強(qiáng)烈的H&I組，再上皮化速度明顯加快，創(chuàng)面在21天時(shí)的愈合率是最為接近正常對(duì)照組的。在糖尿病難愈創(chuàng)面中，HSP90,IGF-1和TGF-β1的表達(dá)相較于正常創(chuàng)面均明顯下調(diào)，而當(dāng)外源性增加創(chuàng)面中HSP90的表達(dá)，能夠提高創(chuàng)面內(nèi)TGF-β1的含量，而聯(lián)合應(yīng)用后，更夠使創(chuàng)

5、面中TGF-β1過表達(dá)（與對(duì)照組相比，P<0.05）。然而從IGF-1的表達(dá)來看，HSP90的作用無法達(dá)到對(duì)照組的水平，但是聯(lián)合用藥的H&I組中IGF-1的表達(dá)則在第7-14天時(shí)被明顯調(diào)高（與對(duì)照組相比，P<0.01），而對(duì)于阻礙創(chuàng)面表皮細(xì)胞遷移的MMP-9，HSP90的表達(dá)與其在創(chuàng)面中的含量密切相關(guān)。結(jié)論：HSP90能夠促進(jìn)糖尿病難愈性創(chuàng)面愈合，但是HSP90與胰島素聯(lián)合應(yīng)用效果更好，能明顯促進(jìn)創(chuàng)面再上皮化。
　　第二部分：HS

6、P90在缺血性難于創(chuàng)面中的作用
　　方法：構(gòu)建兔耳缺血模型，并在耳腹做4個(gè)全層皮膚缺損，刮除軟骨膜。空白組（B組）、HSP90組（C組）、胰島素組（D組）及HSP90&胰島素混合用藥組（E組），每組20個(gè)創(chuàng)面。并于創(chuàng)面涂抹藥物治療后第3天、第7天、第10天、第14天及第21天進(jìn)行大體觀察及活體取材做常規(guī)病理學(xué)觀察，采用免疫組化評(píng)定創(chuàng)面HSP90及MMP-9的表達(dá)水平，并分析其平均光密度值及平均積分光密度值，觀察其表達(dá)強(qiáng)度及規(guī)律。結(jié)

7、果：在缺血性難愈創(chuàng)面中，HSP90表達(dá)缺失，而調(diào)高HSP90的表達(dá)后，能夠明顯改善創(chuàng)面的愈合效果，而此時(shí)，胰島素則無法促進(jìn)創(chuàng)面愈合，即使聯(lián)合應(yīng)用效果也并不明顯。我們同時(shí)發(fā)現(xiàn)在該兔耳缺血難愈創(chuàng)面中，MMP-9的堆積嚴(yán)重影響再上皮化的形成，但是增加HSP90的含量后，創(chuàng)面中MMP-9的堆積明顯減少，說明HSP90能夠有效清除創(chuàng)面中積聚的MMP-9。結(jié)論：HSP90能夠有效促進(jìn)缺血性難愈創(chuàng)面愈合，但與胰島素聯(lián)合應(yīng)用后卻并沒有明顯改善。