輕型TBI患者外周血SDF-1α-CXCR4表達及預后相關性分析.pdf

1、目的:現(xiàn)今針對輕型創(chuàng)傷性顱腦損傷（traumatic brain injury，TBI）的研究越來越受到神經(jīng)外科領域研究人員的關注，對此類患者目前尚缺少公認的生物標記及能對預后恢復水平進行早期判斷的臨床指標。經(jīng)前期研究證實，循環(huán)血內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells，EPCs)可與重型TBI患者的預后相關。且本課題組前期研究證實，EPCs可到達TBI腦損傷部位并參與局部血管新生與組織重建過程，該過程可能是

2、通過激活SDF-1α/CXCR4軸后，趨化CD34+細胞到達損傷部位。而輕型TBI尤其是伴有腦組織損傷的輕型TBI患者存在血管相關損傷。為此，本研究假說:1.輕型TBI患者存在循環(huán)血EPC的特征性變化;2.外周血SDF-1α、以及不同細胞群CXCR4表達水平可以作為輕型TBI患者預后判斷的特征性生物標記。
　　方法:1）臨床共選取TBI患者63例，其中收入輕型組患者53例，中型組患者10例。分別于傷后1d、4d、7d、14d、21

3、d各時間點采集患者外周血樣本，利用BD FACS ArisTM流式細胞儀檢測循環(huán)血EPCs(CD34+/CD133+)及CD34+、CD133+細胞數(shù)量，并測定各類細胞不同時間點表達CXCR4百分比變化、平均熒光強度(Mean fluorescence intensity，MFI)值，進行分析比較。2）通過患者血液樣本提取血清行ELISA檢測，觀察傷后SDF-1α表達情況。保存TBI患者術中切除挫裂傷額葉腦組織，提取蛋白后行Wester

4、n-blot檢測，并將部分腦組織切片后行免疫熒光染色，由此觀察創(chuàng)傷后局部SDF-1α/CXCR4軸蛋白表達情況。3）入組患者均按照擴展格拉斯哥預后評分量表(Extended Glasgow Outcome Scale，GOS-E)及日常生活能力評分量表（Activity of Daily Living Scale，ADLS）標準，對患者傷后3個月、6個月的預后情況進行隨訪觀察，并采用漢密爾頓焦慮量表（Hamilton Anxiety S

5、cale，HAMA）及漢密爾頓抑郁量表(Hamilton Depression Scale，HAMD)對患者傷后心理狀態(tài)進行量化評估。將TBI后流式細胞儀等相關監(jiān)測指標同患者預后恢復情況進行相關性分析，經(jīng)建立受試者工作特征曲線(Receiver operating characteristic curve，ROC)計算臨界值，并參照相對風險率(relative risk，RR)值計算情況，探尋可反映患者預后恢復水平的生物學標記。

6、　　結(jié)果:1）輕型TBI患者傷后外周血EPCs呈現(xiàn)先抑后揚的變化特征，第7、14天顯著高于對照組(p＜0.05)。TBI后CD34+及CD133+細胞數(shù)量早期即呈現(xiàn)較高水平，并隨時間延長逐漸降至正常，輕、中型TBI組間各時間點細胞數(shù)量無統(tǒng)計學差異(p＞0.05)。輕型TBI后各類細胞表達CXCR4百分比及MFI值早期均處于較高水平，后期逐漸接近至基線水平。其中EPCs表達CXCR4百分比中型TBI組4、7、14及21天均顯著高于輕型組(

7、p＜0.05)，傷后第7天CD34+、CD133+細胞及EPCs表達CXCR4水平輕型預后不良組（B組）顯著高于預后良好組（A組）(p＜0.05)。2)經(jīng)Western blot檢測及免疫熒光染色觀察，TBI后挫傷腦組織局部高表達SDF-1α/CXCR4;ELISA檢測觀察，傷后早期血清SDF-1α濃度即顯著增高，中型TBI組1、4天顯著高于輕型TBI組(p＜0.05)，A、B組間無明顯統(tǒng)計學差異(p＞0.05)，后期濃度逐漸減低。3）

8、預后3個月HAMA及HAMD評分輕型TBI組低于中型組(P＜0.05)，預后6個月同3個月比較，HAMA及HAMD評分水平無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，證實中型TBI患者傷后伴有更為嚴重的焦慮及抑郁情緒。參照GOS-E及ADLS評分結(jié)果，經(jīng)Logistic回歸分析得出，循環(huán)血EPC表達CXCR4百分比7天時與輕型TBI患者3個月預后情況存在顯著相關(r=0.428，P=0.021)。求得ROC曲線AUC值為0.78，CXCR4百分比

9、臨界值為42.35％，由此計算得出3個月預后不良的相對風險率(RR)值為2.455。
　　結(jié)論:1）輕中型TBI患者外周血EPCs水平同樣具有先抑后揚的變化特點，提示即使較為輕微的腦組織損傷同樣可以有效動員骨髓EPCs;2）傷后7天為CD34+、CD133+及EPCs細胞數(shù)量由高轉(zhuǎn)低的共同時間轉(zhuǎn)折點，提示該時間點可能是TBI后神經(jīng)血管修復的關鍵時間點;3）相對于外周血CD34+、CD133+及EPCs細胞數(shù)量，EPCs表達CXCR