抗原激活銀屑病患者系統(tǒng)血液免疫反應實驗研究.pdf

1、銀屑病是一種以角質(zhì)形成細胞(KC)過度增殖為特征的免疫介導性疾病，其確切的發(fā)病機制尚不清楚，可能涉及遺傳、感染、代謝異常、創(chuàng)傷及精神緊張等諸多因素的免疫功能紊亂。KC異常增殖和炎癥是銀屑病發(fā)病機制的關(guān)鍵，對NKT細胞的研究提示，天然免疫在銀屑病的發(fā)病機制中可能起重要的作用。紅細胞免疫是天然免疫的重要組成部分，許多疾病的發(fā)病都與紅細胞免疫功能異常有關(guān)。紅細胞不僅具有呼吸功能，而且具有重要的免疫功能。作為血循環(huán)中含量最多的血細胞，紅細胞表達

2、多種天然免疫受體，如CD35、CD44、CD58及CD59等。紅細胞在機體天然免疫和適應性免疫中都占有重要地位。郭峰等提出紅細胞天然免疫主干道理論，認為各種致病性抗原進入血循環(huán)，首先可旁路或MBL途徑激活血漿中的補體等可溶性免疫分子，黏附補體C3b后絕大多數(shù)被數(shù)量具大的紅細胞補體受體(如CR1、CR3)免疫黏附處理，此后交給白細胞，激活白細胞一系列天然免疫與適應性免疫反應，最終導致病原體的徹底清除。近來，郭峰等又根據(jù)系統(tǒng)論的原理構(gòu)建了體

3、外系統(tǒng)血液免疫反應體系。本課題從系統(tǒng)論的觀點出發(fā)，研究在體外系統(tǒng)血液免疫反應條件下，在銀屑病患者血液標本中加入抗原(滅活大腸桿菌)作為免疫原進行激活之后引起相應血細胞及血漿免疫分子的不同表達，從一個新的角度探討銀屑病的免疫學發(fā)病機制。 第一部分銀屑病患者系統(tǒng)血液免疫反應中外周血細胞免疫分子的表達與意義 目的：研究體外系統(tǒng)血液免疫反應條件下銀屑病患者細胞免疫狀況。 方法：將滅活大腸桿菌懸液(3×108/mL)0.2

4、mL作為免疫原激活劑加入枸櫞酸抗凝的全血細胞懸液0.2mL和血漿0.3mL中，37℃水浴1h，用流式細胞儀測定紅細胞CD59表達量、CD4+T細胞、CD8+T細胞比例、CD4/CD8比值、CD4+CD25+T細胞及CD4+CD25highT細胞比例。 結(jié)果：銀屑病對照組與健康對照組比較：紅細胞CD59表達量及CD8+T細胞比例升高，CD4+T細胞比例、CD4/CD8比值、CD4+CD25+T細胞及CD4+CD25highT細胞比

5、例降低；銀屑病實驗組與健康實驗組比較：紅細胞CD59表達量明顯升高，CD4+CD25+T細胞及CD4+CD25highT細胞比例降低明顯降低；健康實驗組與健康對照組比較：CD4+CD25+T細胞及CD4+CD25highT細胞比例升高，紅細胞CD59分子表達水平無明顯變化；銀屑病試驗組與銀屑病對照組比較：紅細胞CD59表達量、CD4+CD25highT細胞比例升高，CD4+CD25+T細胞比例無明顯變化。 結(jié)論：(1)銀屑病患者

6、紅細胞天然免疫功能亢進，可能與銀屑病的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)；(2)銀屑病患者T淋巴細胞亞群失衡，可能在銀屑病的發(fā)病機制中起重要作用；(3)銀屑病患者天然免疫及適應性免疫調(diào)節(jié)功能紊亂。 第二部分銀屑病患者系統(tǒng)血液免疫反應血漿中免疫分子的表達與意義 目的：研究銀屑病患者體外系統(tǒng)血液快速免疫反應中血漿IL-10及IL-12表達水平與銀屑病的關(guān)系。 方法：將滅活大腸桿菌(3×108/mL)0.2 mL加入枸櫞酸抗凝的全血細胞懸

7、液0.2 mL和血漿0.3 mL中，37℃水浴1小時，離心，取上層血漿，固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定血漿IL-10及IL-12含量。 結(jié)果：銀屑病對照組血漿IL-12含量較健康對照組明顯升高，而血漿IL-10含量明顯降低；銀屑病實驗組血漿IL-12含量較銀屑病對照組無明顯變化，健康實驗組血漿IL-12含量較健康對照組明顯升高；銀屑病實驗組及健康實驗組血漿IL-10含量較各自對照組均明顯升高。 結(jié)論：銀屑病

8、患者血漿中細胞因子水平的異?？赡芘c銀屑病的發(fā)病機制密切相關(guān)。 第三部分銀屑病患者系統(tǒng)血液快速免疫反應的網(wǎng)絡調(diào)控關(guān)系 目的：研究在體外系統(tǒng)血液快速免疫反應條件下銀屑病患者細胞免疫分子與血漿免疫分子表達水平的相關(guān)性，探討銀屑病患者天然免疫和適應性免疫的網(wǎng)絡調(diào)控關(guān)系。 方法：同前。 結(jié)果：銀屑病對照組：CD4+CD25highT細胞比例與血漿IL-10含量呈顯著正相關(guān)(r=0.420，p＜0.01)，CD4+C