抗原激活銀屑病患者系統(tǒng)血液免疫反應(yīng)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、銀屑病是一種以角質(zhì)形成細(xì)胞(KC)過(guò)度增殖為特征的免疫介導(dǎo)性疾病，其確切的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，可能涉及遺傳、感染、代謝異常、創(chuàng)傷及精神緊張等諸多因素的免疫功能紊亂。KC異常增殖和炎癥是銀屑病發(fā)病機(jī)制的關(guān)鍵，對(duì)NKT細(xì)胞的研究提示，天然免疫在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中可能起重要的作用。紅細(xì)胞免疫是天然免疫的重要組成部分，許多疾病的發(fā)病都與紅細(xì)胞免疫功能異常有關(guān)。紅細(xì)胞不僅具有呼吸功能，而且具有重要的免疫功能。作為血循環(huán)中含量最多的血細(xì)胞，紅細(xì)胞表達(dá)

2、多種天然免疫受體，如CD35、CD44、CD58及CD59等。紅細(xì)胞在機(jī)體天然免疫和適應(yīng)性免疫中都占有重要地位。郭峰等提出紅細(xì)胞天然免疫主干道理論，認(rèn)為各種致病性抗原進(jìn)入血循環(huán)，首先可旁路或MBL途徑激活血漿中的補(bǔ)體等可溶性免疫分子，黏附補(bǔ)體C3b后絕大多數(shù)被數(shù)量具大的紅細(xì)胞補(bǔ)體受體(如CR1、CR3)免疫黏附處理，此后交給白細(xì)胞，激活白細(xì)胞一系列天然免疫與適應(yīng)性免疫反應(yīng)，最終導(dǎo)致病原體的徹底清除。近來(lái)，郭峰等又根據(jù)系統(tǒng)論的原理構(gòu)建了體

3、外系統(tǒng)血液免疫反應(yīng)體系。本課題從系統(tǒng)論的觀點(diǎn)出發(fā)，研究在體外系統(tǒng)血液免疫反應(yīng)條件下，在銀屑病患者血液標(biāo)本中加入抗原(滅活大腸桿菌)作為免疫原進(jìn)行激活之后引起相應(yīng)血細(xì)胞及血漿免疫分子的不同表達(dá)，從一個(gè)新的角度探討銀屑病的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制。 第一部分銀屑病患者系統(tǒng)血液免疫反應(yīng)中外周血細(xì)胞免疫分子的表達(dá)與意義 目的：研究體外系統(tǒng)血液免疫反應(yīng)條件下銀屑病患者細(xì)胞免疫狀況。 方法：將滅活大腸桿菌懸液(3×108/mL)0.2

4、mL作為免疫原激活劑加入枸櫞酸抗凝的全血細(xì)胞懸液0.2mL和血漿0.3mL中，37℃水浴1h，用流式細(xì)胞儀測(cè)定紅細(xì)胞CD59表達(dá)量、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞比例、CD4/CD8比值、CD4+CD25+T細(xì)胞及CD4+CD25highT細(xì)胞比例。 結(jié)果：銀屑病對(duì)照組與健康對(duì)照組比較：紅細(xì)胞CD59表達(dá)量及CD8+T細(xì)胞比例升高，CD4+T細(xì)胞比例、CD4/CD8比值、CD4+CD25+T細(xì)胞及CD4+CD25highT細(xì)胞比

5、例降低；銀屑病實(shí)驗(yàn)組與健康實(shí)驗(yàn)組比較：紅細(xì)胞CD59表達(dá)量明顯升高，CD4+CD25+T細(xì)胞及CD4+CD25highT細(xì)胞比例降低明顯降低；健康實(shí)驗(yàn)組與健康對(duì)照組比較：CD4+CD25+T細(xì)胞及CD4+CD25highT細(xì)胞比例升高，紅細(xì)胞CD59分子表達(dá)水平無(wú)明顯變化；銀屑病試驗(yàn)組與銀屑病對(duì)照組比較：紅細(xì)胞CD59表達(dá)量、CD4+CD25highT細(xì)胞比例升高，CD4+CD25+T細(xì)胞比例無(wú)明顯變化。 結(jié)論：(1)銀屑病患者

6、紅細(xì)胞天然免疫功能亢進(jìn)，可能與銀屑病的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)；(2)銀屑病患者T淋巴細(xì)胞亞群失衡，可能在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中起重要作用；(3)銀屑病患者天然免疫及適應(yīng)性免疫調(diào)節(jié)功能紊亂。 第二部分銀屑病患者系統(tǒng)血液免疫反應(yīng)血漿中免疫分子的表達(dá)與意義 目的：研究銀屑病患者體外系統(tǒng)血液快速免疫反應(yīng)中血漿IL-10及IL-12表達(dá)水平與銀屑病的關(guān)系。 方法：將滅活大腸桿菌(3×108/mL)0.2 mL加入枸櫞酸抗凝的全血細(xì)胞懸

7、液0.2 mL和血漿0.3 mL中，37℃水浴1小時(shí)，離心，取上層血漿，固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定血漿IL-10及IL-12含量。 結(jié)果：銀屑病對(duì)照組血漿IL-12含量較健康對(duì)照組明顯升高，而血漿IL-10含量明顯降低；銀屑病實(shí)驗(yàn)組血漿IL-12含量較銀屑病對(duì)照組無(wú)明顯變化，健康實(shí)驗(yàn)組血漿IL-12含量較健康對(duì)照組明顯升高；銀屑病實(shí)驗(yàn)組及健康實(shí)驗(yàn)組血漿IL-10含量較各自對(duì)照組均明顯升高。 結(jié)論：銀屑病

8、患者血漿中細(xì)胞因子水平的異?？赡芘c銀屑病的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)。 第三部分銀屑病患者系統(tǒng)血液快速免疫反應(yīng)的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控關(guān)系 目的：研究在體外系統(tǒng)血液快速免疫反應(yīng)條件下銀屑病患者細(xì)胞免疫分子與血漿免疫分子表達(dá)水平的相關(guān)性，探討銀屑病患者天然免疫和適應(yīng)性免疫的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控關(guān)系。 方法：同前。 結(jié)果：銀屑病對(duì)照組：CD4+CD25highT細(xì)胞比例與血漿IL-10含量呈顯著正相關(guān)(r=0.420，p＜0.01)，CD4+C