補(bǔ)體C5a及其受體拮抗劑在阿爾茨海默病小膠質(zhì)細(xì)胞病變模型中的作用.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2010級(jí)碩士學(xué)位論文補(bǔ)體C5a及其受體拮抗劑在阿爾茨海默病小膠質(zhì)細(xì)胞病變模型中的作用TheeffectofC5aandC5areceptorantagonistonthepathologicalchangesofMicroglialcellsinAlzheimer’Sdisease課題來(lái)源：廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目基金(2010Y1一C101)學(xué)位申請(qǐng)人楊帆導(dǎo)師專業(yè)培養(yǎng)培養(yǎng)所在姓名徐書雯名稱神經(jīng)病學(xué)類型學(xué)術(shù)型層次碩士研究生學(xué)院第

2、二臨床學(xué)院2013年3月18日廣州摘要雜的炎性損傷網(wǎng)絡(luò)，引起一系列炎癥反應(yīng)，最終導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞凋亡，補(bǔ)體系統(tǒng)介導(dǎo)的損害是AB細(xì)胞毒性作用機(jī)制中的重要環(huán)節(jié)之一，A13與經(jīng)典補(bǔ)體激活通路的Clq發(fā)生特異性結(jié)合，Clq經(jīng)AB的激活而活化，活化的C1q隨之活化C3、C4、C5因子，并使補(bǔ)體裂解生成多種生物活性片段，包括C3a、C4a、C5a，最終形成膜攻擊復(fù)合物(MAC，C5b9復(fù)合體)，具有神經(jīng)毒性的MAC可直接溶解神經(jīng)元，在AD腦內(nèi)造成神經(jīng)元

3、凋亡。其中，補(bǔ)體系統(tǒng)的C5a在AD致病過(guò)程中的作用不詳，最近研究發(fā)現(xiàn)，在C3基因敲除(C3／)小鼠中，IgG免疫復(fù)合物依然能夠?qū)π∈螽a(chǎn)生C5a依賴的急性肺損傷，且損傷強(qiáng)度與野生型小鼠(C3／)的作用相當(dāng)，這說(shuō)明C5a的產(chǎn)生可以是非C3依賴性的，這是一條嶄新的補(bǔ)體激活途徑，同時(shí)提示，C5a的產(chǎn)生同樣會(huì)產(chǎn)生類似補(bǔ)體系統(tǒng)經(jīng)傳統(tǒng)途徑激活后所導(dǎo)致的炎癥損傷作用。C5a可吸引表達(dá)C5a受體的小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞向活化部位聚集，然后與A13發(fā)揮協(xié)

4、同作用，刺激膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子、趨化因子、黏附分子等，也可直接與小膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)合誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致鄰近的神經(jīng)細(xì)胞損傷或死亡。因此，本研究將驗(yàn)證補(bǔ)體C5a對(duì)AD小膠質(zhì)細(xì)胞激活、炎性介質(zhì)釋放的可能作用及其機(jī)制，并進(jìn)一步明確C5a受體拮抗劑PMX205對(duì)上述病變過(guò)程的干預(yù)作用?！灸康摹拷B142寡聚體和纖維體的制備及其鑒定方法，利用AB卜42寡聚體刺激小膠質(zhì)細(xì)胞建立阿爾茨海默病(AD)小膠質(zhì)細(xì)胞病變模型：在此基礎(chǔ)上，探討補(bǔ)體C5a對(duì)A

5、D小膠質(zhì)細(xì)胞模型釋放炎性因子的作用及其機(jī)制，明確C5a受體拮抗劑對(duì)上述病變過(guò)程的干預(yù)作用。【材料和方法】1材料：小鼠BV2小膠質(zhì)細(xì)胞株購(gòu)白武漢大學(xué)的中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，澳洲胎牛血清(GIBCO)，DMEM／F12高糖培養(yǎng)基(GIBCO)，胰酶(含EDTA，025％，吉泰生化公司)，人工合成的生物晶體A13142(ENZ0公司)，六氟異丙醇(HFIPSigma)，二甲基亞砜(DMSO，MPBiomedicats)，補(bǔ)體C5a(HBTⅡ