甜瓜種質(zhì)資源多樣性的RAPD研究.pdf

1、甜瓜種質(zhì)資源極其豐富，中國是重要起源地之一，有著豐富的薄皮和厚皮甜瓜種質(zhì)資源。我國甜瓜種質(zhì)資源的儲(chǔ)備對(duì)我國的甜瓜產(chǎn)業(yè)以至世界甜瓜產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展有著重要意義。對(duì)種質(zhì)資源搜集和保存一方面保護(hù)了重要的有代表性的材料，減少或避免基因的流失和資源材料的重復(fù)。另一方面對(duì)資源材料進(jìn)行遺傳多樣性分析，構(gòu)建核心種質(zhì)庫，有利于進(jìn)一步研究和利用種質(zhì)資源。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全國各育種單位目前所保存的國內(nèi)外甜瓜種質(zhì)資源約3500份。新疆吐魯番葡萄瓜類研究所是我國厚

2、皮甜瓜種質(zhì)的保存單位，中國農(nóng)科院鄭州果樹所瓜類室是全國薄皮甜瓜種質(zhì)的保存單位。 筆者選取了30份有代表性的甜瓜種質(zhì)資源，用RAPD技術(shù)對(duì)品種(系)親緣關(guān)系進(jìn)行分析，遺傳多樣性分析結(jié)果為我省的地方品種資源利用提供了可靠的理論依據(jù)，對(duì)甜瓜今后的育種工作具有指導(dǎo)意義。主要結(jié)果如下： 1、用CTAB法對(duì)甜瓜嫩葉片提取基因組DNA，經(jīng)紫外分光光度儀檢測(cè)，1.8<2.0，OD<,260/230>>2.0，C

3、TAB法提取的質(zhì)量、產(chǎn)率完全滿足于RAPD-PCR擴(kuò)增，重復(fù)性好。用于RAPD結(jié)果分析，具有可靠性。 2、用正交試驗(yàn)對(duì)反應(yīng)體系中各組分優(yōu)化，篩選出適合甜瓜RAPD-PCR反應(yīng)參數(shù)為：DNA 100ng、引物0.30μmol/L、dNTPs 0.30 mmol/L、10×PCR Buffer 2.5μl、MgCl<,2>3 mmol/L、Taq酶1.0U。 3、從60條隨機(jī)引物中篩選出16條表現(xiàn)穩(wěn)定的引物對(duì)甜瓜30個(gè)甜瓜品

4、種(系)、雜種進(jìn)行PCR擴(kuò)增，共擴(kuò)增出134條RAPD條帶，114條為多態(tài)性條帶，多態(tài)性條帶頻率為85.07％，平均每條引物擴(kuò)增8.4個(gè)條帶、包括1.3條單態(tài)性帶和7.1條多態(tài)性帶。每條引物的多態(tài)性帶數(shù)4～12條，分子量大小為100～3000bp。 4、甜瓜種質(zhì)資源聚類分析表明，當(dāng)相似性閥值為0.21時(shí)，全部生物型可分為薄皮甜瓜和厚皮甜瓜兩類，其親緣關(guān)系最遠(yuǎn)。用pogene31對(duì)群體的遺傳多樣性的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，種群間的Nei指數(shù)