人參皂苷Rh2對荷結腸癌CT-26小鼠抗瘤作用及免疫指標的影響.pdf

1、目的：研究人參皂苷Rh2對荷瘤小鼠抗腫瘤作用及對免疫指標的影響，尋求抗腫瘤作用強而毒副作用小的中藥有效成分。
　　 方法：首先進行腫瘤細胞系的培養(yǎng)傳代。腫瘤細胞培養(yǎng)至一定數(shù)量時，用胰蛋白酶消化重懸，制備成腫瘤細胞懸液，接種于32只健康雌雄各半BALB/c小鼠右側頸背部皮下，建立荷小鼠結腸癌CT-26動物模型。2周后動物腫瘤模型已穩(wěn)定，除正常對照組外，將成瘤均勻且腫瘤大小相近的24只荷瘤小鼠模型隨機分成3組：0.4％乙醇灌胃對照組

2、、人參皂苷Rh2（0.4％乙醇混懸液）灌胃治療組、5-FU腹腔注射治療組。治療21天后，各組小鼠稱重，摘取小鼠眼球，收集血液標本，靜置離心后吸取上層血清取樣，Elisa（酶聯(lián)免疫吸附）法測定各組小鼠血清IL-2水平，用酶標儀在450nm波長下測量各小鼠血清的OD（吸光度）值并用應用labsys雷勃酶標儀軟件v5.01計算出各孔的IL-2濃度；剝取荷瘤小鼠皮下移植瘤標本，電子天平稱重并做好記錄，以計算各組荷瘤小鼠抑瘤率。然后取樣，用10％

3、福爾馬林固定，標本用免疫組織化學染色后，在倒置顯微鏡下檢測各組小鼠皮下移植瘤內CD25+細胞，早期凋亡腫瘤細胞Cleaved-caspase3表達情況；摘取各組小鼠胸腺、脾臟，電子天平稱重后，做好記錄，以計算各種小鼠胸腺指數(shù)及脾指數(shù)。
　　 結果：
　　 1.人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對照組相比，其抑瘤率為81.76％，5-FU腹腔注射治療組與酒精灌胃對照組相比，其抑瘤率為91.32％。
　　 2.人參皂苷R

4、h2對荷結腸癌小鼠皮下移植瘤內的早期凋亡腫瘤細胞表達Cleaved-caspase3的影響：人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對照組相比，小鼠皮下移植瘤內的早期凋亡腫瘤細胞Cleaved-caspase3表達率明顯增加（P<0.01），具有顯著統(tǒng)計學意義。
　　 3.人參皂苷Rh2（0.4％乙醇混懸液）灌胃治療組與5-FU腹腔注射治療組相比，小鼠皮下移植瘤內的早期凋亡腫瘤細胞Cleaved-caspase3表達率不及后者（P<0.0

5、1）。
　　 4.5-FU腹腔注射治療組同人參皂苷Rh2灌胃組、酒精灌胃對照組相比胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清IL-2水平均明顯降低（P<0.05）。
　　 5.人參皂苷Rh2對荷結腸癌小鼠的免疫器官的影響：在該實驗中人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對照組相比，小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　 6.人參皂苷Rh2對荷結腸癌小鼠的細胞因子的影響：人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對照組相比，小

6、鼠的血清IL-2水平差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　 7.人參皂苷Rh2對荷結腸癌小鼠皮下移植瘤內的CD25+細胞的影響：人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對照組相比，小鼠皮下移植瘤內的CD25+細胞浸潤無明顯增多（P>0.05）。
　　 8.小鼠荷瘤以后，胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清IL-2水平均較正常小鼠降低（P<0.05），與前人動物實驗結果一致。
　　 結論：人參皂苷Rh20.4mg/kg（0.4％乙醇混