人參皂苷Rh2對(duì)荷結(jié)腸癌CT-26小鼠抗瘤作用及免疫指標(biāo)的影響.pdf

1、目的：研究人參皂苷Rh2對(duì)荷瘤小鼠抗腫瘤作用及對(duì)免疫指標(biāo)的影響，尋求抗腫瘤作用強(qiáng)而毒副作用小的中藥有效成分。
　　 方法：首先進(jìn)行腫瘤細(xì)胞系的培養(yǎng)傳代。腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)至一定數(shù)量時(shí)，用胰蛋白酶消化重懸，制備成腫瘤細(xì)胞懸液，接種于32只健康雌雄各半BALB/c小鼠右側(cè)頸背部皮下，建立荷小鼠結(jié)腸癌CT-26動(dòng)物模型。2周后動(dòng)物腫瘤模型已穩(wěn)定，除正常對(duì)照組外，將成瘤均勻且腫瘤大小相近的24只荷瘤小鼠模型隨機(jī)分成3組：0.4％乙醇灌胃對(duì)照組

2、、人參皂苷Rh2（0.4％乙醇混懸液）灌胃治療組、5-FU腹腔注射治療組。治療21天后，各組小鼠稱(chēng)重，摘取小鼠眼球，收集血液標(biāo)本，靜置離心后吸取上層血清取樣，Elisa（酶聯(lián)免疫吸附）法測(cè)定各組小鼠血清IL-2水平，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)量各小鼠血清的OD（吸光度）值并用應(yīng)用labsys雷勃酶標(biāo)儀軟件v5.01計(jì)算出各孔的IL-2濃度；剝?nèi)『闪鲂∈笃は乱浦擦鰳?biāo)本，電子天平稱(chēng)重并做好記錄，以計(jì)算各組荷瘤小鼠抑瘤率。然后取樣，用10％

3、福爾馬林固定，標(biāo)本用免疫組織化學(xué)染色后，在倒置顯微鏡下檢測(cè)各組小鼠皮下移植瘤內(nèi)CD25+細(xì)胞，早期凋亡腫瘤細(xì)胞Cleaved-caspase3表達(dá)情況；摘取各組小鼠胸腺、脾臟，電子天平稱(chēng)重后，做好記錄，以計(jì)算各種小鼠胸腺指數(shù)及脾指數(shù)。
　　 結(jié)果：
　　 1.人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對(duì)照組相比，其抑瘤率為81.76％，5-FU腹腔注射治療組與酒精灌胃對(duì)照組相比，其抑瘤率為91.32％。
　　 2.人參皂苷R

4、h2對(duì)荷結(jié)腸癌小鼠皮下移植瘤內(nèi)的早期凋亡腫瘤細(xì)胞表達(dá)Cleaved-caspase3的影響：人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對(duì)照組相比，小鼠皮下移植瘤內(nèi)的早期凋亡腫瘤細(xì)胞Cleaved-caspase3表達(dá)率明顯增加（P<0.01），具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.人參皂苷Rh2（0.4％乙醇混懸液）灌胃治療組與5-FU腹腔注射治療組相比，小鼠皮下移植瘤內(nèi)的早期凋亡腫瘤細(xì)胞Cleaved-caspase3表達(dá)率不及后者（P<0.0

5、1）。
　　 4.5-FU腹腔注射治療組同人參皂苷Rh2灌胃組、酒精灌胃對(duì)照組相比胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清IL-2水平均明顯降低（P<0.05）。
　　 5.人參皂苷Rh2對(duì)荷結(jié)腸癌小鼠的免疫器官的影響：在該實(shí)驗(yàn)中人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對(duì)照組相比，小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　 6.人參皂苷Rh2對(duì)荷結(jié)腸癌小鼠的細(xì)胞因子的影響：人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對(duì)照組相比，小

6、鼠的血清IL-2水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　 7.人參皂苷Rh2對(duì)荷結(jié)腸癌小鼠皮下移植瘤內(nèi)的CD25+細(xì)胞的影響：人參皂苷Rh2灌胃組與酒精灌胃對(duì)照組相比，小鼠皮下移植瘤內(nèi)的CD25+細(xì)胞浸潤(rùn)無(wú)明顯增多（P>0.05）。
　　 8.小鼠荷瘤以后，胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清IL-2水平均較正常小鼠降低（P<0.05），與前人動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。
　　 結(jié)論：人參皂苷Rh20.4mg/kg（0.4％乙醇混