CREB磷酸化在老年大鼠術(shù)后認知功能障礙中的作用.pdf

1、目的:1.探討麻醉手術(shù)對老年大鼠認知功能的影響。2.初步探討核轉(zhuǎn)錄因子CREB在老年大鼠術(shù)后認知功能障礙中的作用。
　　方法:第一部分:(1)18月齡雌、雄性老齡SD大鼠各14只，隨機分為對照組和麻醉手術(shù)組（每組雌雄各半，n=14/組）。麻醉手術(shù)組大鼠經(jīng)4.5％七氟烷誘導(dǎo)麻醉后行氣管插管，2％-2.5％七氟烷維持2個小時，麻醉過程中實時監(jiān)測大鼠的呼吸頻率、呼末二氧化碳、氣體氧濃度和七氟烷濃度等指標，并在麻醉下行部分肝葉切除手術(shù);對

2、照組大鼠不做任何處理。(2)造模前對兩組大鼠同時進行6天的Morris水迷宮定向航行試驗訓(xùn)練，每天訓(xùn)練3次，第7天使用Morris水迷宮進行術(shù)前1天的記憶測試試驗，在第8天造模，并在造模后的1、3、7天使用Morris水迷宮記憶測試試驗檢測大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力，用smart junior軟件記錄大鼠游泳距離、潛伏期及游泳速度等指標，統(tǒng)計大鼠在目標象限中的時間百分比和距離百分比。第二部分:18月齡雌、雄性老年SD大鼠各8只，隨機分為對照組

3、(C，雌雄各半，n=4)和麻醉手術(shù)組（S，雌雄各半，n=12），各組的處理方法同實驗第一部分，手術(shù)組大鼠分別在術(shù)后1、3、7天取材。應(yīng)用免疫熒光雙標檢測對照組及手術(shù)組術(shù)后1、3、7天海馬CA1、CA2、DG區(qū)p-CREB的表達情況;使用western blot方法檢測對照組及手術(shù)組術(shù)后1、3、7天海馬組織p-CREB的蛋白量。
　　結(jié)果:第一部分:(1)術(shù)前6天訓(xùn)練的結(jié)果顯示兩組的學(xué)習(xí)能力無明顯差異，術(shù)前1天測試結(jié)果顯示兩組的記憶

4、能力無明顯差異;(2)和術(shù)前1天的測試結(jié)果相比，麻醉手術(shù)組大鼠的目標象限游泳時間百分比在術(shù)后1天(P=0.006)和3天(P=0.011)都顯著降低;目標象限游泳距離百分比在術(shù)后1天(P＜0.001)和3天(P=0.002)也都顯著降低。第二部分:(1)免疫熒光雙標結(jié)果顯示術(shù)后1、3天海馬CA1、CA2區(qū)p-CREB明顯減少，在術(shù)后第7天逐漸恢復(fù);(2) Western blot結(jié)果顯示術(shù)后3天p-CREB明顯降低。
　　結(jié)論:第