mTOR在STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠認(rèn)知功能障礙中的作用研究.pdf

1、目的:
　　 研究鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）誘導(dǎo)的糖尿病大鼠海馬組織哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR，包括p-mTOR和t-mTOR)的變化與其糖尿病病程、糖尿病認(rèn)知功能障礙及凋亡相關(guān)蛋白的相關(guān)性。
　　 方法:
　　 將雄性SD大鼠隨機(jī)分成糖尿病組(DM組)和正常對(duì)照組(Con組)，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，DM組大鼠腹腔注射STZ(6

2、0mg/kg)，3天后檢測(cè)尾靜脈隨機(jī)血糖＞16.7mmol/1者，視為造模成功(n=27);對(duì)照組大鼠(n=21)腹腔注射等量檸檬酸緩沖液。建模成功后將兩組大鼠分別喂養(yǎng)11周、15周和20周，每周次大鼠數(shù)量均相等。當(dāng)喂養(yǎng)到所需的周次時(shí)，正常組和糖尿病組大鼠各取5只，先行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)知功能，再采血檢測(cè)血糖和血脂，取新鮮海馬組織液氮凍存，用于提取組織蛋白行p-mTOR、t-mTOR、Bax、Bcl-2的Westernblot

3、ing檢測(cè)，其余的大鼠用4％多聚甲醛灌注后取腦，石蠟切片行海馬組織的免疫組化染色，并用tunel法檢測(cè)海馬組織細(xì)胞凋亡情況。
　　 結(jié)果:
　　 1.Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)表明，與正常對(duì)照組比較，成模后11周，糖尿病組大鼠的逃避潛伏期和原平臺(tái)所在象限停留的時(shí)間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);成模后15及20周，糖尿病組大鼠逃避潛伏期和原平臺(tái)所在象限停留的時(shí)間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，逃避潛伏期較正常組延長(zhǎng)，原

4、平臺(tái)所在象限停留的時(shí)間較正常組減少。在3組糖尿病大鼠中，隨病程延長(zhǎng)，逃避潛伏期逐漸延長(zhǎng)(P＜0.05)、原平臺(tái)所在象限停留的時(shí)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.tunel法檢測(cè)結(jié)果顯示，成模后20周，糖尿病組大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞出現(xiàn)明顯凋亡，陽性神經(jīng)元的細(xì)胞核呈棕黃色，核固縮深染，正常組神經(jīng)元胞核無棕黃著色。
　　 3.與正常對(duì)照組比較，成模后11周，糖尿病大鼠海馬組織凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2及B

5、ax/Bcl-2比值的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，成模后15及20周，糖尿病大鼠海馬組織Bcl表達(dá)無明顯變化，Bax的表達(dá)及Bax/Bcl-2比值明顯增加(P＜0.05)，且隨病程延長(zhǎng)呈逐漸加重趨勢(shì)。
　　 4.海馬組織免疫組化結(jié)果顯示，與同周次正常對(duì)照組比較，成模后11周，糖尿病大鼠海馬CA1區(qū)t-mTOR表達(dá)無明顯變化，錐體細(xì)胞胞漿無明顯著色，成模后15周，t-mTOR表達(dá)增加，胞漿著棕黃色，細(xì)顆粒狀，成模后20周，t

6、-mTOR表達(dá)明顯增加，胞漿著棕黃色，粗顆粒狀。
　　 5.與正常對(duì)照組比較，成模后11周，糖尿病組大鼠海馬組織p-mTOR和t-mTOR的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);成模后15及20周，糖尿病組大鼠海馬組織p-mTOR和t-mTOR的表達(dá)增加，且隨病程延長(zhǎng)逐漸增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。
　　 結(jié)論:
　　 1.STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠認(rèn)知功能障礙隨病程延長(zhǎng)逐漸加重。
　　 2.