脂聯(lián)素和腫瘤壞死因子-α在糖尿病大鼠心肌病變中的變化.pdf

1、本文研究目的：觀察鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)糖尿病大鼠不同時(shí)期脂聯(lián)素(adiponectin，APN)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)血清、心肌組織中的表達(dá)水平及心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變，探討APN、TNF-α在糖尿病大鼠心肌病變發(fā)生、發(fā)展中的作用以及它們之間的關(guān)系。 研究方法：雄性Wistar大鼠64只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組再分為1、4、8、12周組。實(shí)驗(yàn)組大鼠32只，一次性空腹腹腔注射STZ枸櫞酸緩沖

2、液50mg/kg，誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型，給藥72小時(shí)后血糖大于16.7mmol/L為成模；對(duì)照組大鼠等體積腹腔注射枸櫞酸緩沖液。兩組同時(shí)喂養(yǎng)，并分別于1、4、8、12周每組各8只，測(cè)體重、空腹血糖，空腹心內(nèi)采血、取心臟稱重，左心室同一部位取心肌。取左心室肌常規(guī)制作病理和電鏡切片，在光鏡、電鏡下觀察左心室的病理組織學(xué)改變。采用酶聯(lián)免疫(ABC-ELISA)法測(cè)定血清APN水平。血清TNF-α值采用放射免疫法測(cè)定。心肌組織APN、TNF-α表

3、達(dá)水平采用免疫組化SABC法檢測(cè)，并利用圖像分析系統(tǒng)測(cè)定心肌組織APN、TNF-α的光密度值。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并對(duì)實(shí)驗(yàn)組心肌APN、TNF-α的表達(dá)作直線相關(guān)性分析。 研究結(jié)果： 1.光鏡下，實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞肥大、疏松樣變，心肌細(xì)胞外間質(zhì)增加。經(jīng)圖像分析，實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞面積隨著病程的延長(zhǎng)增大(P<0.01)，對(duì)照組無差異。電鏡下，實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞肌絲稀疏、排列紊亂，線粒體數(shù)目增多，腫脹、變性，嵴排列紊亂。隨著病程進(jìn)展，病變漸加

4、重。實(shí)驗(yàn)組12周心肌毛細(xì)血管基底膜不均勻增厚較對(duì)照組有顯著差異(P<0.05)。 2.實(shí)驗(yàn)組血清APN水平1周時(shí)與對(duì)照組無差異，其余時(shí)期均高于對(duì)照組(P<0.01)，并隨著病變發(fā)展而升高(P<0.01)。血清TNF-α水平實(shí)驗(yàn)組均高于對(duì)照組(1周P<0.05，余P<0.01)，亦隨著病變發(fā)展而升高(1周與4周、8周與12周比較P<0.05，余P<0.01)。 3.APN對(duì)照組心肌細(xì)胞中可見散在棕黃色顆粒。實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞內(nèi)

5、出現(xiàn)棕黃色顆粒樣物質(zhì)，并隨著病變進(jìn)展，由散在點(diǎn)狀漸融合成片，顏色加深，其平均光密度值逐漸增高(P<0.01)，實(shí)驗(yàn)組1周與對(duì)照組無差異，其余不同時(shí)期均高于對(duì)照組(P<0.01)。TNF-α實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞中棕紅色顆粒樣物隨病程進(jìn)展亦逐漸增多、增重，其平均光密度值逐漸增高(P<0.01)，不同時(shí)期均高于對(duì)照組(P<0.01)。 4.Pearson相關(guān)性分析顯示實(shí)驗(yàn)組心肌組織APN與TNF-α平均光密度值呈直線正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r=

6、0.896(P<0.01)。 研究結(jié)論： 1.成功的建立了STZ糖尿病大鼠模型。其心肌病理學(xué)改變符合糖尿病心肌病改變。 2.APN血清、組織的表達(dá)水平不同時(shí)期實(shí)驗(yàn)組均高于對(duì)照組，并隨著心肌病變進(jìn)展而逐漸升高(除了血清APN水平1周實(shí)驗(yàn)組與其對(duì)照組無差異外)。提示APN在糖尿病心肌病變中發(fā)揮保護(hù)作用。 3．TNF-α血清、組織的表達(dá)水平不同時(shí)期實(shí)驗(yàn)組均高于對(duì)照組，并隨著心肌病變進(jìn)展而逐漸升高。可見TNF-