ER、PR與HER-2在乳腺癌中表達(dá)的臨床病理意義及溶瘤性單純皰疹病毒G47Δ對乳腺癌的基礎(chǔ)研究.pdf

1、第一部分：乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤，無論是國外或是國內(nèi)，乳腺癌發(fā)病率都呈逐年上升的趨勢。乳腺癌腫瘤分期是乳腺癌臨床治療和判斷預(yù)后的重要指標(biāo)，但目前的腫瘤分期由于診斷和治療參考時間上的滯后性顯現(xiàn)出其局限性，因此從分子生物學(xué)水平了解乳腺癌腫瘤特性，對于進(jìn)一步提高治療水平和更好地判斷預(yù)后的發(fā)展是非常必要的。乳腺是性激素作用的靶器官，因此雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)在乳腺癌組織的表達(dá)及臨床意義顯得尤為突出。人類表皮生長因子受體2(H

2、ER-2)參與調(diào)控細(xì)胞生長、分化及遷移。HER-2過表達(dá)擾亂正常的細(xì)胞代謝周期，促進(jìn)細(xì)胞癌變的發(fā)生。目前國內(nèi)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道ER、PR及HER-2的表達(dá)率相差很大，可能由于研究樣本數(shù)量相對較小。本研究旨在通過大樣本回顧性分析探討ER、PR及HER-2在乳腺癌中的表達(dá)及三者與患者年齡、腫瘤大小、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期等相關(guān)性。
　　 第二部分：隨著乳腺癌治療新理念的普及和新藥物的應(yīng)用，現(xiàn)代乳腺癌的臨床治療已經(jīng)取得了長足的進(jìn)步。患者的

3、術(shù)后復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移率都明顯降低。在一些傳統(tǒng)治療手段之外，新的生物治療的研究進(jìn)展也讓人們充滿期待。HSV-1溶瘤性單純皰疹病毒就是一種用于生物治療的溶瘤病毒載體，目前對這一病毒載體的研究主要是基礎(chǔ)研究和少量的臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)。G47△病毒足一種第三代的HSV-1病毒載體，結(jié)構(gòu)上包含ICP6，ICP47和y34.5_種非必要基因修改，G47△病毒具備高效、高生物安全的溶瘤能力。本文旨在探討單純皰疹病毒載體G47△病毒對HER-2高表達(dá)的人類乳腺癌

4、細(xì)胞株的殺傷作用。
　　 材料與方法
　　 第一部分：對中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院在2001年1月～2007年12月新收治的910例可手術(shù)治療乳腺癌的ER、PR、HER-2及各種臨床指標(biāo)進(jìn)行回顧性相關(guān)分析，探討ER、PR及HER-2的臨床病理意義。
　　 第二部分：體外培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞株SK-BR-3和MCF-7。兩種乳腺癌細(xì)胞株各分成三組(陰性對照組、病毒組MOI=0.01和病毒組MOI=0.1)。將G47△病毒按滴

5、度(MOI=0.01和MOI=0.1)加入病毒組培養(yǎng)液中，陰性對照組在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入不含病毒的稀釋液。X-gal染色并觀察G47△對癌細(xì)胞的生長狀態(tài)的影響。
　　 結(jié)果
　　 第一部分：ER、PR及HER-2在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義在本院新收治的910例的乳腺瘤患者中，浸潤性導(dǎo)管癌占89.4％，浸潤性小葉癌占1.7％，導(dǎo)管原位癌占5％，其它類型占4.9％；腫瘤直徑小于2cm占29.9％，在2～5cm之間的占45.6％

6、，大于5cm的占24.5％；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的占54.2％，三個及三個以下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的占25.5％，四個及四個以上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的占20.3％。ER表達(dá)陰性的占33.0％，PR表達(dá)陰性的為27.4％，HER表達(dá)為+++的占20.1％。我們發(fā)現(xiàn)隨著患者年齡的增長，其就診時淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移率減小(P<0.001)，而其他指標(biāo)與年齡無明顯相關(guān)性；腫瘤大小與淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移率成正相關(guān)(P<0.001)，與ER及PR的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P<0.001)，與HER-2

7、表達(dá)呈正相關(guān)(P=0.02)；ER與PR表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.001)；ER及PR與HER-2呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.001)。在不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)的乳癌中，ER、PR及HER-2的表達(dá)無顯著差異。
　　 第二部分：單純皰疹病毒載體G47△對人類乳腺癌細(xì)胞的殺傷作用
　　 1.G47△病毒可有效殺傷人類乳腺癌細(xì)胞株SK-BR-3和MCF-7。HER-2高表達(dá)的SK-BR-3細(xì)胞與ER(+)的MCF-7同樣被有效殺傷，表明G