兩株濱海植物內生真菌次級代謝產物及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、微生物是發(fā)現新型藥物先導結構的重要資源，但是陸源微生物天然產物結構的重復發(fā)現問題已經日益突出；海洋來源微生物由于高壓力、高鹽度等因素使得其次級代謝產物化學結構與生物活性具更好的新穎性和多樣性，而濱海地區(qū)作為海洋與陸地的交界帶，其微生物資源既具有前述兩者的共同特征，又有不同于兩者的性質。本論文對濱海地區(qū)的植物樣品進行微生物分離培養(yǎng)，并結合抗腫瘤篩選和化學分析篩選，選取了2株植物內生真菌進行深入的次級代謝產物結構分析和活性評價。實驗內容包括

2、：濱海植物來源微生物分離純化；微生物的初篩和目標微生物的復篩；目標微生物的發(fā)酵條件摸索、優(yōu)化及發(fā)酵；發(fā)酵液的提取，單體化合物的分離、純化、結構鑒定、衍生化以及部分化合物初步抗腫瘤活性測定。
　　本研究從對廣西來源的12個紅樹林植物樣品（楊葉肖槿、黃槿、木欖、紅海欖、海漆、桐花樹、無瓣海桑、白骨壤、水黃皮、秋茄、海芒果、欖李）和其它3個濱海植物樣品（青島濱海植物樣品2個，東營濱海鹽地堿蓬植物樣品1個）進行微生物的分離純化，共得到真菌

3、菌株147株，對這147株真菌進行了抗腫瘤活性的初篩和復篩，得到具有抑制細胞增殖活性的菌株8株，對這8株微生物菌株進行了HPLC分析，選取其中2株菌作為下步研究的目標菌株，它們的共同特征為：HPLC指紋圖譜中含有紫外相似的系列吸收峰，出峰時間在30-45分鐘之間，這些特征表明這2株菌的次級代謝產物中同系物豐富，具有中等極性。通過對各種發(fā)酵條件下浸膏的TLC薄層點板、HPLC指紋圖譜、抗腫瘤活性篩選和浸膏產量的綜合考慮，確定了目標菌株最優(yōu)

4、的發(fā)酵時間，培養(yǎng)基以及培養(yǎng)方式。
　　采用各種分離提取方法，從青霉屬真菌LD-68中分離得到7個化合物，并對化合物1進行了結構衍生化獲得7個化合物；從桔青霉真菌LD-11中分離得到20個化合物；從兩株真菌中共獲得34個化合物的結構類型包括彎孢霉菌素類化合物、雜肟環(huán)化合物、桔霉素類化合物、苯的衍生物等。
　　用MTT法對化合物1-5、8-18進行了抗腫瘤活性測定，表明化合物2~5、18對A549和K562細胞具有中等抑制活性，