藥用植物朱砂根的開發(fā)利用研究.pdf

1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文藥用植物朱砂根的開發(fā)利用研究姓名：劉均利申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：森林培育指導(dǎo)教師：馬明東20070501四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文4 ) 愈傷組織分化培養(yǎng)：致密型愈傷組織為最適外植體，在培養(yǎng)基M S + 6 一B A1 ．O m g ／L + N A A0 ．1 m g ／L 上可分化出芽和根，但不定芽沒有萌發(fā)。5 ) 光照條件的影響：光照對增殖培養(yǎng)與分化培養(yǎng)均有利。通過對朱砂根皂苷分離純化條件、含量測定方法和結(jié)構(gòu)

2、鑒定的研究，得到以下結(jié)論：1 ．建立了朱砂根皂苷浸膏提取工藝。結(jié)果表明，采用甲醇水溶液為提取溶劑的浸膏提取工藝為：溫度7 0 “ C ，甲醇濃度8 0 ％，分別用8 倍、6 倍、4 倍甲醇回流提取3 次，時(shí)間分別為3 ，2 和1 h ，減壓濃縮，水沉離心，A B 一8 大孔樹脂柱層析，8 0％甲醇洗脫，7 0 “ C 以下真空烘干，得粗提物浸膏，收率5 ％。2 ．首次報(bào)道了朱砂根皂苷標(biāo)準(zhǔn)品制備技術(shù)。在浸膏提取工藝基礎(chǔ)上，取粗提物浸膏，硅

3、膠柱層析，二氯甲烷一乙醇一乙酸乙酯( 4 ：1 ．5 ：1 ，V ／V ／V ) 洗脫，T L C 檢驗(yàn)，收集合格段，7 0 ℃減壓濃縮干，乙醇重結(jié)晶，得標(biāo)準(zhǔn)品，朱砂根皂苷含量達(dá)9 8 ．5 8％。3 ．建立了T L C 法分析條件；采用硅膠G F 。板，二氯甲烷一乙醇一乙酸乙酯( 4 ：2 ：1 ，V ／V ／V ) 為展開劑，1 0 9 6 硫酸乙醇溶液顯色，1 0 0 ℃下烘干。該條件下T L C 圖譜清晰，斑點(diǎn)明顯且分離較好，R

4、 f 值約0 ．6 ，重現(xiàn)性好。4 ．建立了R P —H P L C 法分析條件：色譜柱為S H I k I - P A C KV P - O D SC 。。( 1 5 0 m m X4 ．6 咖，5 0 m ) ，流動相為乙腈～水( 3 7 16 3 ，v ／v ) ，流速1 ．O m L ／m i n ，檢測波長2 0 5 n m ，柱溫4 0 ℃，靈敏度0 ．1 6 A U F S 。該色譜條件下朱砂根皂苷峰形良好，保留時(shí)間約1

5、2 ．2 m i n 。方法的平均加標(biāo)回收率9 4 ．1 4 ～9 9 ．3 8 ％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差( R S D ) 為0 ．4 8 ～1 ．9 7 ％( n = 3 ) 。該方法具有較高的回收率，穩(wěn)定性、精密度和重復(fù)性良好，結(jié)果可靠。采用此法可對朱砂根皂苷含量進(jìn)行準(zhǔn)確的測定。5 ．對朱砂根野生植株及組織培養(yǎng)物中的皂苷含量進(jìn)行了測定。結(jié)果表明：朱砂根野生植株中根的皂苷含量最高，是朱砂根提取皂苷的最佳部位。組培苗中，根內(nèi)皂苷含量最高，是天

6、然植株根中含量的5 4 ．6 2 ％。組培所得莖段愈傷組織中，疏松型愈傷組織皂苷含量較高，可達(dá)天然植株莖中的皂苷含量水平。6 ．采用質(zhì)譜和核磁共振分析確定朱砂根皂苷分子量為1 0 7 4 ，分子式c n ‰％，結(jié)構(gòu)為西克拉敏A 一3 一o _ [ d —L - 毗喃鼠李糖( 1 —4 ) 一p —D - 吡喃葡萄糖( 1 —4 ) ] [ B—D _ 吡喃葡萄糖( 1 —2 ) ] a —L - 阿拉伯糖。關(guān)鍵詞：朱砂根朱砂根皂苷組織培